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产品选择问题

RNA提取系列产品介绍及选择指南~

首先询问并确认客户提取RNA的大致样本种类,是动物组织细胞?植物?血液样本?真菌?细菌?病毒?酵母?

——根据客户提取的不同样本种类,推荐客户选择不同的RNA提取产品。

一、RNA提取试剂盒的选择

1. 动物组织细胞样本:

(1) 爱普科学的AipPure TRIzol 总RNA提取试剂(货号:RE201),就是Invitrogen的TRIzol,我们质量完全和进口一样可以100%替代进口TRIzol。

(2) RE203 AipPure 超纯总RNA快速提取试剂盒(离心柱型),这个等于是TRIzol加离心柱子(和天根的DP419完全一样),在TRIzol的基础上加了离心柱子,速度更快,纯度更高,操作更简单。等于是AipPure TRIzol 总RNA提取试剂(货号:RE201)加离心柱子。

(3) RE240 AipEasy 组织/细胞RNA快速提取试剂盒(离心柱型),这款等于是Qiagen的74104完全一样,它的优点在于不用苯酚,氯仿等毒性物质,速度最快,但是残留DNA可能稍多,必要时候还可能要用DNA酶消化。

(4) RE241 AipEasy Plus 组织/细胞RNA快速提取试剂盒(离心柱型) ,这款等于是Qiagen的74134完全一样,是目前世界上最先进的试剂盒。15分钟提取,不用苯酚,氯仿,也不残留DNA,不用DNA酶消化直接可以做荧光定量PCR,价格只有Qiagen同类产品的几分之一。目前国内技术领先,天根没有此产品。天根的DP431理论上是对应这个产品的,但是天根的需要DNA酶消化,时间长,步骤繁琐,还容易降解RNA。

动物组织细胞RNA提取的总结:

(1) 首先推荐就是RE241 AipEasy Plus 组织/细胞RNA快速提取试剂盒(离心柱型)。

(2) 客户觉得RE241贵,或者客户习惯用天根的DP419,就推RE203 AipPure 超纯总RNA快速提取试剂盒(离心柱型),等于天根DP419。

(3) 就是想替换Invitrogen的TRIzol或者其它公司的TRIzol,就推AipPure TRIzol 总RNA提取试剂(货号:RE201)。爱普科学生产的TRIzol承诺肯定技术第一。

(4) 想替换Qiagen的74104,就推RE240 AipEasy 组织/细胞RNA快速提取试剂盒(离心柱型)。也可以建议我们的Qiagen产品74104的升级版本,也就是Qiagen的74134的替换产品:RE241 AipEasy Plus 组织/细胞RNA快速提取试剂盒(离心柱型) 可供选择, RE240要加DNA消化才不残留基因组DNA,RE241不用另外DNA酶消化了。

(5) 客户如果用的天根的DP431, 可以推荐用RE241替换,RE241比天根这款更快速更简单,天根需要DNA酶消化,时间长,步骤繁琐,还容易降解RNA,我们的一根基因组DNA清除柱子,一分钟清除掉基因组DNA。

注意:我们的RNA提取技术国内第一,刚才提到的任何一个产品,我们都可以保证质量达到和进口水平一样,Qiagen,天根,omega等任何一家公司的同类产品能做的,我们不能做到效果一致,或者更好,无条件退货退款。但是也要注意,如果客户的样本特殊导致的提取产量低或者提取失败的,那不是我们的问题,进口的和天根的产品也提取失败了,那也不是我们的问题。专业知识不熟悉的业务员千万不要保证任何样本任何情况都100%提取,只能保证任何样本只要别家公司能提取的,我们就一定能提取,而且肯定只好不坏。

2. 心脏、骨骼肌、血管、气管、食管、眼球、皮肤、耳朵等纤维丰富组织样本:

选择RE263 AipEasy 纤维类组织RNA快速提取试剂盒(离心柱型) ,适用于快速提取心脏、骨骼肌、血管、气管、皮肤和其它纤维丰富的组织RNA,相当于Qiagen的74704。

3. 植物样本:

植物千变万化,种类繁多,非常复杂,世界上任何一家公司任何一种试剂盒也无法确保100%提取成功。因此选择推荐植物RNA提取试剂盒必须多和客户和技术人员沟通。

A:TRIzol可以提取的植物样本,首先询问客户的样本是否曾经用别的试剂或试剂盒提取过,TRIzol是否可以提取成功?如果TRIzol可以提取成功的样本:

(1)  首先有两种选择:

● 第一是选择我们的AipPure TRIzol 总RNA提取试剂(货号:RE201)这个就是Invitrogen的TRIzol,我们质量完全和进口一样可以100%替代进口TRIzol。

● 第二是选择RE210 AipPure 通用植物总RNA快速提取试剂盒(离心柱型) ,适用于普通植物组织细胞样本,这个试剂盒的原理,成分和RE203完全一样,也是TRIzol加离心柱子,在TRIzol的基础上加了离心柱子,速度更快,纯度更高,操作更简单。等于是AipPure TRIzol 总RNA提取试剂(货号:RE201)加离心柱子。

(2)  然后根据客户的特殊具体需求比如想速度更快,操作更简单,还不想用TRIzol这种苯酚,氯仿毒性物质的客户还有两种选择:

● 第一种是选择RE211 AipEasy 通用植物RNA快速提取试剂盒,带DNase I(离心柱型) ,这个盒子和天根的DP432 RNAprep pure植物总RNA提取试剂盒一样,不用苯酚,氯仿,速度最快,操作最简单,带DNA酶柱上消化,得到的RNA可以直接做荧光定量PCR。可以提取包括水稻、玉米、小麦、拟南芥、番茄、烟草和棉花等多糖多酚少的简单植物样本。比天根的优点在于适应性更广泛,纯度更高。

● 第二种是选择RE213 AipEasy 多糖/多酚植物RNA快速提取试剂盒(离心柱型),这个试剂盒是不带DNA酶柱上消化的,和Qiagen的74904 RNeasy Plant Mini Kit 一样,但是本试剂盒适应性更广泛,一般多糖多酚的如冬青、梅花、杨树、月季、玫瑰、茶花也都可以提取,但是不带DNA酶柱上消化,更适合只做普通的反转录和克隆。如果知道用户使用天根的DP432,全式金的ER301则对应我们的RE211,如用户使用Qiagen的74904对应我们RE213。

B:TRIzol无法提取的植物样本,如果客户说他们曾经用过TRIzol,但是TRIzol无法提取成功,或者没有用过TRIzol,但是知道TRIzol无法提取成功的样本,说明是比较复杂的多糖多酚的样本,那么RE201和RE210产品的TRIzol原理是肯定不行了。别无选择只有三个可能推荐:

(1) 叶片、花瓣、花芽类样本相比叶片类的样本包括像葡萄叶子、杨树叶子、棉花叶片类代谢产物多酚丰富的种类相对简单,可以用RE214 AipEasy Plus 多糖/多酚植物RNA快速提取试剂盒(离心柱型)提取(RE214是RE213的升级版,加了一根基因组DNA清除柱子,一般可以清除DNA到电泳肉眼不可见), 如果RE214提取产量低,可以用RE214的同一个盒子按照RE213的步骤提取可能提高产量(略去基因组清除柱步骤可能提高产量);如果RE214或者RE213提取残留肉眼可见的基因组DNA,可以按照RE213步骤提取并加一个DNA酶柱上消化的步骤(货号:RE280)来清除残留DNA。

(2) 如稻谷种子、百合鳞茎、葡萄果实、唐菖蒲的球茎、中草药块根等复杂多糖多酚色素淀粉含量特别大,这一类很难提取, 只能尝试RE215 AipEasy 多糖/多酚/复杂植物RNA快速提取试剂盒(离心柱型)。

(3) 其它公司试剂盒已经提取失败或者产量低的复杂植物,首先尝试RE215 AipEasy 多糖/多酚/复杂植物RNA快速提取试剂盒(离心柱型)进行提取,例如天根的DP441多糖多酚植物总RNA提取试剂盒提取失败的或者要替换天根DP441的情况,也可以选择RE215。

总结:我们公司的植物RNA提取技术国际领先,市面上所有公司的所有提取产品,我们都能有更好的对应产品,而且,我们还有很多独特的植物RNA提取试剂盒申请了专利。包括其他公司提取失败的样本,如Qiagen提取失败的黑加仑、冬青、葡萄果实等等,我们都可以做。而且,我们应用质量很好,可以用于芯片,miRNA测序,建库,RACE等各种要求高的下游应用。

● 植物RNA选择口诀:

(1) 简单感觉好提取的样本,首选RE214,效果不好就再试RE215,RE214和RE215都效果好的首选用RE214。

(2) RE215提取效果不好的,也可以试试RE214。

(3) RE214产量低想要产量高的,也可以试试RE215

4. 真菌样本:

(1) 如果是丝状真菌,选择是RE213 AipEasy 多糖/多酚植物RNA快速提取试剂盒(离心柱型),没错,真菌就是用RE213植物RNA提取的盒子来提取的。这个盒子RE213和Qiagen的74904 RNeasy Plant Mini Kit完全一样。客户要搞不清楚,就去Qiagen官网下载原版说明书看看就行了,确保RE213和Qiagen的74904一样。Qiagen的74904 RNeasy Plant Mini Kit从植物和真菌中纯化多达100 ug总RNA,30分钟即可获得高品质的总RNA,无需苯酚/氯仿抽提、无需氯化铯梯度离心、无需氯化锂或乙醇沉淀,即可达到出色的RNA回收率,即用型RNA适合各种下游应用。

(2) 如果客户是不太清楚是哪种真菌,为了保险起见,现在提取真菌也推荐用RE214,并且建议首选RE214。

5. 血液样本:

A:未保护直接冻存血液(血液RNA保存的时候,一定要先处理了再保存,直接把抗凝血液冻到-80℃冰箱,RNA肯定会有降解,至少部分降解。保存血液用于后续提取RNA的详细方法,请参考爱普科学“血液RNA常温保存运输和提取试剂盒产品选择知识大全”)提取冻存的血液样本RNA的时候,你没有太多选择,只有选择RE231 AipPure 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒(离心柱型),这款试剂盒可以直接裂解全血(白细胞和红细胞混合的全血),而不需要和普通试剂盒一样,先裂解红细胞得到白细胞再往下面进行。因为你不可以先融解冻血,然后再裂解红细胞,因为血液细胞冰冻后已经受损破裂,RNA酶释放出来了,如果你先裂解液红细胞再裂解白细胞,就会在过程中降解RNA,此外,RNA已经释放了,裂解红细胞过程中去上清的时候也会丢失一部分RNA。所以这个时候,不能裂解红细胞再去折腾了,必须使用可以直接裂解全血的裂解液(RE231试剂盒),趁RNA酶还没有完全降解RNA的时候,迅速和全血混匀,抑制住RNA酶,然后往下面提取。
B:新鲜的血液

(1) 也可以用RE231 AipPure 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒(离心柱型)。

(2) 可以选择RE230 AipPure 超纯全血总RNA快速提取试剂盒(离心柱型),这个原理就是先红细胞裂解液裂解红细胞得到白细胞,然后TRIzol(货号:RE201)裂解白细胞,最后离心柱子漂洗。

(3) RE232 AipEasy 全血RNA快速提取试剂盒(离心柱型),这款和Qiagen的QIAamp Blood RNA Kit一样,优点是不用苯酚和氯仿(TRIzol)毒性物质。缺点是残留DNA较多,如果下游需要做荧光定量PCR,请推荐和RE280 AipPure DNase I柱上消化试剂盒(RNase-Free)一起使用。该款产品加DNA酶柱上消化等于天根的DP433。

(4) 最后,如果客户经费特别紧张,也可以选择RE231的不用离心柱的版本。RE202 AipPure TRIzol LS 总RNA提取试剂(液体样本),LS就是Lliquid Sample的意思,液体样本RNA提取试剂,就是专门提取液体样本的TRIzol版本。这个缺点就是不用离心柱子纯度差一点(当然一般不影响试验结果),繁琐一点,对操作技术的要求高一点,但是样本量太小也不适合。

注意:全血DNA提取容易残留较多DNA,因此,如果下游是做荧光定量PCR,一般建议同时购买RE280 AipPure DNase I柱上消化试剂盒(RNase-Free)配套使用。

总结:如果是新鲜血样本,首先推荐RE231 AipPure 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒(离心柱型)和RE230 AipPure 超纯全血总RNA快速提取试剂盒(离心柱型);如果你想不用苯酚/氯仿的产品进行提取,就推荐RE232 AipEasy 全血RNA快速提取试剂盒(离心柱型)。如果你是冰冻血液,别无选择,只有推荐RE231 AipPure 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒(离心柱型);需要处理、运输、保存血液样本后再提取也是推荐RE231 AipPure 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒(离心柱型)(具体参见“血液RNA常温保存运输和提取试剂盒产品选择知识大全”)

6. 酵母样本:

● RE262 AipEasy 酵母RNA快速提取试剂盒,带裂壁酶(离心柱型),不用苯酚和氯仿毒性物质,快速简单。

7. 细菌样本:

● RE260 AipEasy 细菌RNA快速提取试剂盒(离心柱型),不用苯酚和氯仿毒性物质,快速简单。

8. 病毒样本(从血浆,血清,体液等无细胞体系):

● RE252 AipPure 病毒基因组RNA快速提取试剂盒(离心柱型);

● RE251 AipPure Plus 病毒基因组DNA/RNA快速提取试剂盒(离心柱型);

● RE231 AipPure 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒(离心柱型)。

二、分离提取试剂盒的选择

1. 从同一个样本里面同时提取RNA、DNA:

● RE266 AipPure 组织/细胞(RNA/DNA)分离提取试剂盒(离心柱型),这个等同于Qiagen的80204 AllPrep DNA/RNA Mini Kit,提取效果完全一样。

2. 从同一个样本里面同时提取RNA、DNA、Protein蛋白:

● RE267 AipPure 组织/细胞(RNA/DNA/Protein)分离提取试剂盒(离心柱型),这个等于是Qiagen的80004 AllPrep DNA/RNA/protein Mini Kit,提取效果完全一样。

3. 从同一个样本里面同时提取RNA、microRNA、DNA、Protein蛋白:

● MR208 AipPure 组织/细胞(microRNA/RNA/DNA/Protein)分离提取试剂盒(离心柱型)。

4. 从同一个样本里面同时提取RNA、microRNA、DNA:

● MR207 AipPure 组织/细胞(microRNA/RNA/DNA)分离提取试剂盒(离心柱型)。

总结:任何从一个样本里面同时提取microRNA、RNA、DNA、蛋白或者任意组合的客户需求,我们都可以做。

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