Lipo系列脂质体细胞转染试剂介绍：

● Lipocat2000：本款脂质体转染试剂是实验室最常用、最经济实惠的脂质体转染试剂，通常用于大部分的细胞转染；做普通细胞的转染不要选择Lipocat2000C，带C的转染试剂是增强型，浓度较高对细胞的毒性比较大，容易损伤细胞。

● Lipocat2000C：本款脂质体转染试剂是肿瘤细胞专用转染试剂，做肿瘤细胞的转染可以选择带Lipocat2000C，肿瘤细胞好养且不怕毒性，大部分肿瘤细胞不好转染，所以用带C的浓度高的加强型转染试剂，转染效果最好最佳。

● Lipocat3000：本款脂质体转染试剂是适用于一些娇贵细胞和老师比较在意的细胞，因为Lipocat3000的转染方式对细胞的毒性伤害是最小的，当然了价格也是比较贵的转染试剂。

特殊说明：不是浓度越高越好，浓度越高对细胞的毒性伤害就越大，像Lipocat3000并不是转染效率最高，而是对细胞的毒性毒性伤害小，所以个别情况下，有时还不如Lipocat2000对细胞的转染效率高。

Lipo系列脂质体细胞转染试剂常见问题解答：

Q1、Lipo2000和Lipo3000的区别在哪？

A1：Lipo2000：单组份，通用性强，质粒DNA和siRNA 可以共转染，但用量比例大。优点的是经济实惠，缺点是对难转染的细胞效果一般。Lipo3000：Lipo2000的升级款，加了DNA孵育试剂，双组分，在难转染的细胞面前也有相对较高的效率，毒性也比2000更低，用量也更少。 缺点是主要针对DNA质粒转染，在共转染和RNA领域效果一般。 

Q2、转染过程中需不需要换液？

A2：转染过程中涉及两个阶段的换液操作，一是在转染前需要提前把营养液换成无血清培养基(且无抗生素)，其目的是更好的转染效果，避免血清及抗生素的干扰。二是在转染后 6小时需要把转染的工作液换掉，目的是防止转染试剂毒性长期影响。这次换液，有条件的话肯定是换液效果会更好，达到最佳的转染效果和降低对细胞的毒性具体换不换液，我们建议是分细胞：常规细胞好转染的可以不换液，如果相对难转染的细胞，换液是必须的，以便提升转染效率。 

Q3、脂质体能加在血清、培养基、PBS或其他液体里面？

A3：转染过程中血清会影响脂质体和核酸复合物的形成，不能有血清，但此时细胞是最脆弱最需要营养，最好是OptiMEM减血清培养基，它是血清替代营养液，可以保证无血清的情况下，又能保证转染过程的营养供给，常规培养基也可以，但不建议使用PBS，因为PBS没有营养成分。 

Q4、质粒和脂质体用量比例怎么换算?

A4：初次摸索条件，推荐：DNA和转染试剂比例为1:2-1:3，细胞实验原则上没有固定比例，和细胞类别和细胞本身状态影响很大，建议客户每次做实验前参照说明书用量都做个梯度，以实际最佳效率逐渐优化，尽量不要用按部就班的比例和用量。 

Q5、慢病毒转染用Lipo2000可以吗?

A5：转染是复杂的过程，与转染试剂 、病毒大小和类别、还有细胞的类别等关系密切，不能说都可以，只能说像腺病毒 293 等常规的是可以的，如果之前用过进口的Lipo2000，那我们的也可以，因为作用原理是一样的，可以直接替换，或者用过其他品牌的脂质体的，成功转染，那我们一般也没有问题，但如果之前没做过这方面相关实验，那只能说让客户试下，摸索一下条件。 

Q6、Lipo2000同时转染DNA质粒和miRNA，可以吗?

A6：Lipo2000可同时转DNA和siRNA，两者加起来的量和说明书量一样即可，Lipo2000同时转DNA和miRNA 效果的话一般，如果质粒多的情况下，可以分开转染，如果质粒量少的情况下，可以把他们混合共转染，总量不超过实验用量即可。

Q7、Lipo3000对难转细胞，如何优化?

A7：转染试剂和质粒用量建议提前做个梯度预实验，原则上细胞状态允许的情况下，转染试剂用量越高，效率也会随着提高，选细胞生长状态最好，密度最佳(90-95%)的时候转染，期间最好不要加血清和抗生素，转染时间控制在6小时左右，质粒提前纯化好，强烈推荐爱普科学的无内毒素质粒小提(货号：PE205)

Q8、LipoRNAmax 转 siRNA没有作用，为何？如何优化?

A8：RNA转染不成功的因素比较多，需要从几个方面找原因并优化。首先蛋白水平检测要在48-72小时内，多测几个时间点，时间太短蛋白水平可能会出现检测不准的情况；RNA的有效性也要排查下，比如转染过程中RNA降解，RNA浓度不够，引物设计位置尽量不要在同侧，干扰靶点等，如果这些都没问题，再通过优化转染试剂用量。最好先做个预实验，事先用荧光转染先验证下能否成功转染，同时优化下最佳用量比例。