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常用技术资料

一抗和二抗的区别、反应原理及抗体筛选

1. 一抗和二抗的反应原理:

● 第一抗体:第一抗体就是能和非抗体性抗原(特异性抗原)特异性结合的蛋白。种类包括单克隆抗体和多克隆抗体。

● 第二抗体:第二抗体是能和抗体结合,即抗体的抗体,其主要作用是检测抗体的存在,放大一抗的信号。二抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质,去免疫异种动物,由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。用抗AIV H5亚型血凝素单克隆抗体为包被抗体,兔抗AIV IgG为第二抗体。

2. 一抗和二抗的区别:

    第一抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合。第二抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说,抗原进入机体刺激机体免疫系统产生免疫应答,由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗)。

    一抗可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。二抗可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗。而一抗识别底物。这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来。

举例:利用抗原-抗体反应原理,就是以一抗作为探针,它与目的蛋白作用并连接,再用带有荧光(或同位素)标记的二抗与一抗作用,最后显色,发光位置就有目的蛋白。

3. 相关标记解释:

AP:碱性磷酸酶标记

APC:APC标记

FITC:异硫氰酸荧光标记

PE:PE标记

HRP:辣根过氧化物酶标记

Peroxidase:过氧化物酶

Gold:胶体金标记

Biotin:生物素标记

RBITC:罗丹明标记

Cy3:Cy3标记

Cy5:Cy5标记

Cy5.5:Cy5.5标记

Cy7:Cy7标记

PE-Cy3:PE-Cy3标记

PE-Cy5:PE-Cy5标记

PE-Cy5.5:PE-Cy5.5标记

PE-Cy7:PE-Cy7标记

Alexa Fluor 350:AF350标记

Alexa Fluor488:AF488标记

Alexa Fluor:555:AF555标记

Alexa Fluor:647:AF647标记

4. Host Species(宿主):

Human:

Mouse:小鼠

Rat:大鼠

Rabbit:兔子

Goat:

Chicken:猴子

alpaca:羊驼

Pig:

Porcin:

Sheep:绵羊

Hamster:仓鼠

Donkey:猴子

Duck:鸭子

Guinea Pig:豚鼠/天竺鼠

syrian hamster:叙利亚仓鼠,金丝熊

5. Application(应用):

ELISA:酶联免疫

Flow Cyt:流式检测

ICC/IF:细胞免疫荧光

IHC(PFA fixed):免疫组化

IHC-Fr:冷冻切片的免疫组化

IHC-P:石蜡切片的免疫组化

IM:免疫

WB:蛋白质印迹/Western Blot

6. Immunogen Species(免疫原动物):

Cow:奶牛

Cat:

Dog:

Firefly:萤火虫

Fruit fly:果蝇

A wide range of other invertebrates:应用广泛的无脊椎动物

7. 相关英文解释:

Reactivity:反应

Conjugate:结合的

Unconjugated:非结合

Polyclonal:多克隆

Monclone:单克隆

Target / Protein:目标靶/蛋白

Clonality:无性系形成能力

Modifications:修饰

Application:应用

Assay Type:检测类型

Quantitative:定量的

Semi-quantitative:半定量的

Sandwich(quantitative):夹层结构/数量

Enzyme activity:酶活力

Direct:直接的

ELISA set:ELISA集

Biologically Active:生物活性

Isotype:同型像

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