储存条件：冰块运输，-20℃避光保存，保质期12个月；5× MTT溶液收到后建议分装保存到-20℃，避光保存。

产品概述：

    MTT分析法以代谢还原噻唑蓝3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide(MTT)为基础。活细胞的线粒体中存在与NADP相关的脱氢酶，可将黄色的 MTT还原为不溶性的蓝紫色的甲臜(Formazan)，死细胞此酶消失，MTT不被还原。用 DMSO溶解Formazan后可用酶标仪在490nm波长处检测光密度。

使用方法：

1. 在96孔板加入细胞100µL/孔(约1×104)，放置在37℃ 5%的CO2细胞培养箱培养24小时。

2. 加入适当浓度的受试化合物。

3. 将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4. 将5× MTT用Dilution Buffer稀释成1× MTT。

5. 每孔加50µL 1× MTT，在37℃孵育4小时，使MTT还原为甲臜。

6. 吸出上清液，每孔加150µL DMSO使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。

7. 酶标仪在490nm波长处检测每孔的光密度。

结果分析：

1. 细胞的存活率：

a) 将各测试孔的OD值减去本底OD值(完全培养基加MTT，无细胞)或空白药物孔 OD值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞)，各重复孔的OD 值取均数±SD。

b) 细胞的存活率以T/C%表示T为加药细胞的OD值，C为对照细胞的OD值。

细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

2. 求出T/C = 50%时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。

注意事项：

1. 悬浮细胞用此法时必须经离心后才能吸出上清再加DMSO。

2. Formazan 的生成不仅与活细胞数成比例，也受作用时间的影响，因此当样品较多时测定的OD值可能随时间而变。

3. 用不同试剂溶解Formazan时，测定的OD值不同：DMSO溶解时，建议在490nm波长下检测；若用含SDS的相关溶剂溶解，建议在570nm下检测。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5. 本产品仅限于专业人员科学研究使用，不得用于临床诊断和药品等用途。

产品说明书.pdf