货号及规格：  

试剂盒组成及储存：

产品储存：室温储存和运输，12个月内有效。

产品简介：可逆蛋白印迹染色是一种灵敏的检测硝酸纤维素膜或者PVDF膜上转移蛋白的方法，可以非常有效的检测蛋白转膜效果。传统的丽春红染色(Ponceau S)敏感度非常低(250ng)，染色退色快并且红色不容易拍照保存。本公司独有配方的染色液具有蛋白高亲和性，和蛋白印迹膜上蛋白快速结合呈现清晰的兰色，敏感度比传统丽春红染色高10倍（<25ng）。此外染色液中特殊化合物和蛋白的结合力主要是离子键的可逆结合，不影响后续的Western blot。该试剂盒常用于Western blot 分析前证实蛋白确实转膜成功，并可以估计不同泳道蛋白上样量是否基本一致。

产品特点：

1. 无背景染色，敏感度高，比传统丽春红染色高10倍。

2. 蛋白染成翠兰色，解决了丽春红染色红色不易照相保存的问题。

3. 可逆染色，完全不影响蛋白性质，不影响抗体抗原结合性质Western blot实验，和质谱分析、N末端测序等兼容。

4. 步骤简单，方便快速。

5. 推荐使用硝酸纤维素膜，大部分情况染膜效果优于PVDF膜。

操作步骤：

提示：各操作步骤都要保证足够量的液体盖过膜，可以用手轻摇，也可以在摇床上中速振摇进行。开始实验前请将10×的漂洗液和洗脱液稀释成1×的工作液备用（不要长时间暴露于空气，防止pH值变化）。

1. 染色

1) 转膜后将印迹膜放置于一个干净的容器中，倒入纯水涮洗几秒钟倒空。如果是干燥的PVDF膜，用100％甲醇湿化。

2) 根据膜大小倒入适量的染色液（只要确保膜都浸没在染色液内就可以，10-20ml足够染色一块普通的8×8cm的硝酸纤维膜），用手轻摇染色30-60秒（也可根据染色情况延长）。染上色的蛋白条带会呈现兰条带。

2. 漂(去除背景染色)

1) 倒弃染色剂，加入适量的漂洗液后，涮洗5-10秒钟后倒去，重复该步骤一遍(如背景高，可适当延长漂洗时间)。

2) 再加入适量漂洗液后，摇床上中速振摇2-5分钟。

3) 可选步骤（仅用于PVDF膜）：如果PVDF膜漂洗效果不理想，可以加用20％甲醇漂洗一次。

4) 倒弃漂洗液，加入适量纯水后，涮洗5-10秒钟后倒去，重复该步骤一遍(如背景高，可适当延长漂洗时间),此时可以观察到翠兰的蛋白条带。

5) 加入适量纯水后，摇床上中速振摇2-5分钟。观察到满意条带后，此时处于湿润状态的膜（放在纯水中照相对比效果更好）就可以照相了。

3. 脱色(消除蛋白条带染色)

1) 倒弃纯水后，加入20-30ml脱色液，摇床上中速振摇2分钟。

注意：对大部分蛋白来说，2分钟中速振摇比较合适，但也可以延长时间到5分钟，脱色迅速的只要结果满意即可中止脱色。

2) 倒弃脱色液，加入适量纯水后，涮洗5-10秒钟后倒去，重复该步骤一遍。

注意事项：

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品仅供科研用途，不用于临床诊断。

问题与解决方法：

产品说明书.pdf