货号及规格：

试剂盒组成和储存：

储存条件：常温运输，本产品收到后按照上面指示温度存放，12个月内有效。

产品介绍：BCIP/NBT是碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase,AP）的显色底物，经免疫反应固定的碱性磷酸酸酶可催化BCIP/NBT产生化学呈色反应，在蛋白转印膜阳性蛋白条带处原位形成蓝紫色的化合物沉淀。

使用方法：

1. 按常规操作，将蛋白样品进行SDS-PAGE电泳，转膜（硝酸纤维素膜和PVDF膜均可使用）。封闭30-120 min，一抗孵育1小时或过夜；漂洗3-5次，碱性磷酸酶标记二抗孵育30-120 min，漂洗3-5次。如上述步骤采用磷酸缓冲液，需换用Tris缓冲液漂洗3-5次以完全去除磷酸成分对于AP反应液的抑制作用。

2. 取1ml AP Reaction Buffer，加入10μl NBT 溶液和10μl BCIP 溶液，充分混匀。

注意：根据膜的大小，AP Buffer、NBT、BCIP 的量等比例扩大。

3. 把经洗涤的PVDF/NC 膜浸入显色底物混合物中，于室温平缓摇动进行温育。

4. 细心观察反应过程，待蛋白膜上条带呈色明显，而无明显背景时(一般约5-15 分钟)，把膜浸入水中漂洗停止反应。

注意：若信号太弱可增加反应时间。

5. 拍摄膜照片或直接保存膜留作永久试验纪录。

注意事项：

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品仅供科研用途，不用于临床诊断和药物等。

产品说明书.pdf