组织/细胞总蛋白提取试剂盒/Tissue/Cell Total Protein Extraction Kit
货号:P316-01
品牌:爱普科学
货期:现货
价格:¥720
- 产品介绍
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- 产品问答
货号及规格:
目录编号 | 包装规格 |
P316-01 | 100mL |
P316-02 | 200mL |
试剂盒组成及储存:
Components | P316-01 | P316-02 |
Total Protein Extraction Buffer(TPEB) | 100mL | 200mL |
PMSF(Protease Inhibitor,100mM ) | 1mL | 2mL |
产品配制和储存:为方便运输,提供的PMSF为晶体状,收到后,可短暂离心后,加入1ml无水乙醇或者异丙醇溶解成100mM PMSF储液,2-8℃保存至少半年,-20℃长期保存,可分装成小份贮存于-20℃。TPEB可2-8℃保存半年,-20℃长期保存。如TPEB有沉淀析出,可37℃-60℃水浴重新溶解完全后回复到室温使用。
产品简介:本试剂盒提供全套试剂,适用于从各种哺乳动物细胞(原代或传代细胞、贴壁或悬浮细胞等)和各种实体软组织(如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织)提取总蛋白。提取过程简单方便,无须超速离心机。本试剂盒含有的独特变性剂能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等蛋白研究。
使用方法:
A. 细胞总蛋白提取
1. 每500μl裂解液,在使用前数分钟内加入5 μl PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 取5-10×106个细胞,在4℃,500 g条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
3. 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每5×106个细胞中加入500 μl冷的裂解液,混匀后,在4℃条件下振荡15-20分钟。
5. 在4℃,16,000 g条件下离心15分钟。
6. 快速将上清转移至另一预冷的干净离心管,即可得到总蛋白。
B. 组织总蛋白提取
1. 每500μl 裂解液,在使用前数分钟内加入5μl PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 取100mg 组织样本剪碎,加入裂解液,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
3. 将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中,在4℃,16000 g条件下离心5分钟。
4. 快速将上清转移至另一预冷的干净离心管,即可得到总蛋白。
上述蛋白提取物可立即用于后续实验,或分装后于-80℃冰箱保存备用。
注意事项:
1. 实验过程中的所有试剂可冰上预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。
2. 整个过程须保持样品处于低温状态。
3. 蛋白浓度用BCA法测定(货号:P301)。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5. 本产品仅供科研用途,不用于临床诊断。
品牌: | 爱普科学 |
英文名称: | Tissue/Cell Total Protein Extraction Kit |
规格: | 100mL(Kit)/200mL(Kit) |
性状: | 液体 |
储存温度: | 2-8℃ |
保质期: | 12个月 |
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