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热稳定核糖核酸酶 H/Thermostable RNase H

货号:NS606-01

品牌:爱普科学

货期:现货

价格:680

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产品储存:4℃运输;-20℃保存,12个月有效期。

产品简介:本产品RNase H(Thermostable),即耐热核糖核酸酶H,来源于Thermus thermophilus,是一种在较高温度(65℃以上)下仍然保持活性的核糖核酸内切酶。RNase H(Thermostable)与常见的E.coli RNase H有类似的酶学性质,特异性地水解DNA-RNA杂合链中的RNA,水解产物为5′磷酸末端的寡核糖核苷酸和单链DNA,不能水解单链或双链DNA或RNA。RNase H(Thermostable)在65℃以上条件下仍具有很高的酶活性,其在70℃时的半衰期可达几个小时,在95℃的半衰期仍可达30min左右。本产品与常见的E.coli RNase H用途类似,主要用于cDNA第二条链合成前去除mRNA、去除与poly(dT)杂交的mRNA中的poly(A)、通过DNA序列实现对RNA的定点剪切等。

产品来源:来源于大肠杆菌,由大肠杆菌重组表达。

酶活定义:在50℃条件下,在50μL体系中,20min内水解40pmol荧光标记的含有25个碱基对的杂合链(RNA/DNA)底物产生1nmol核糖核苷酸所需的酶量定义为一个酶活单位。

产品浓度:5U/μL。

产品纯度:SDS-PAGE检测纯度≥95%。

失活或抑制:加入适量蛋白酶K或者加入5%体积的0.5M EDTA。

酶存储Buffer:50mM Tris-HCl,1M NaCl,0.1mM EDTA,1mM DTT,50%Glycerol,pH 7.5。

10x Reaction Buffer:500mM Tris-HCl,30mM MgCl2,100mM DTT,pH 8.3。

操作步骤:(DNA-RNA杂合连中去除RNA)

1. 参考下表配置反应体系:

Component

Volume

Thermostable RNase H

1μL

10x Reaction Buffer

2μL

DNA杂合链

≤2μg

Nuclease-Free water

To 20μL

注:上述体系中DNA-RNA杂合链不超过2μg。

2. 反应体系于50℃孵育20min。

3. 反应完成后加入适量蛋白酶K或者加入5%体积的0.5M EDTA终止反应。

注意事项:

1. 本产品的最佳反应温度高于65℃,在95℃时仍具有活性,其在65℃时的活性是在37℃时的3-4倍。

2. 酶的取用都应放在低温冰盒内操作,使用完毕后立即存储于-20℃保存。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4. 本产品仅供科研使用,严禁用于临床诊断和药物等用途。

品牌: 爱普科学
英文名称: Thermostable RNase H
规格: 250U
性状: 液体
储存温度: -20℃
保质期: 12个月
地址:北京市昌平区北清路1号珠江摩尔国际大厦5号楼2单元305
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