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产品储存:4℃运输;-20℃保存,12个月有效期。
产品简介:本产品RNase H(Thermostable),即耐热核糖核酸酶H,来源于Thermus thermophilus,是一种在较高温度(65℃以上)下仍然保持活性的核糖核酸内切酶。RNase H(Thermostable)与常见的E.coli RNase H有类似的酶学性质,特异性地水解DNA-RNA杂合链中的RNA,水解产物为5′磷酸末端的寡核糖核苷酸和单链DNA,不能水解单链或双链DNA或RNA。RNase H(Thermostable)在65℃以上条件下仍具有很高的酶活性,其在70℃时的半衰期可达几个小时,在95℃的半衰期仍可达30min左右。本产品与常见的E.coli RNase H用途类似,主要用于cDNA第二条链合成前去除mRNA、去除与poly(dT)杂交的mRNA中的poly(A)、通过DNA序列实现对RNA的定点剪切等。
产品来源:来源于大肠杆菌,由大肠杆菌重组表达。
酶活定义:在50℃条件下,在50μL体系中,20min内水解40pmol荧光标记的含有25个碱基对的杂合链(RNA/DNA)底物产生1nmol核糖核苷酸所需的酶量定义为一个酶活单位。
产品浓度:5U/μL。
产品纯度:SDS-PAGE检测纯度≥95%。
失活或抑制:加入适量蛋白酶K或者加入5%体积的0.5M EDTA。
酶存储Buffer:50mM Tris-HCl,1M NaCl,0.1mM EDTA,1mM DTT,50%Glycerol,pH 7.5。
10x Reaction Buffer:500mM Tris-HCl,30mM MgCl2,100mM DTT,pH 8.3。
操作步骤:(DNA-RNA杂合连中去除RNA)
1. 参考下表配置反应体系:
Component | Volume |
Thermostable RNase H | 1μL |
10x Reaction Buffer | 2μL |
DNA杂合链 | ≤2μg |
Nuclease-Free water | To 20μL |
注:上述体系中DNA-RNA杂合链不超过2μg。
2. 反应体系于50℃孵育20min。
3. 反应完成后加入适量蛋白酶K或者加入5%体积的0.5M EDTA终止反应。
注意事项:
1. 本产品的最佳反应温度高于65℃,在95℃时仍具有活性,其在65℃时的活性是在37℃时的3-4倍。
2. 酶的取用都应放在低温冰盒内操作,使用完毕后立即存储于-20℃保存。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4. 本产品仅供科研使用,严禁用于临床诊断和药物等用途。
品牌: | 爱普科学 |
英文名称: | Thermostable RNase H |
规格: | 250U |
性状: | 液体 |
储存温度: | -20℃ |
保质期: | 12个月 |
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