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产品储存:4℃保存,保质期一年。
产品介绍:RNA性质不稳定,极易降解。溶解于无RNase 的TE 或水中的纯化RNA,即便是储存于-20 ºC也难免降解。为解决这一问题,可以将RNA 沉淀或RNA 溶液溶解于RNA 长期保存液中,可以允许RNA在4 ºC 过夜或-20 ºC 保存至少1 年而免于降解。RNA 长期保存液是RNA 样品运输和中长期保存的最佳选择。需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA,或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot。
使用说明:
1. 用RNA长期保存液溶解RNA沉淀:
1) 对固体RNA沉淀,每0.4-4μg RNA沉淀加入1μl的RNA长期保存液,反复吹打混匀或者室温振荡15-30 分钟溶解沉淀。干燥的RNA沉淀难以溶解,可反复吹打混匀后50 ºC 加热10-15分钟。最好先用小体积无RNase的TE或水溶解RNA沉淀,然后按液态RNA 操作。
2) 对液态RNA溶液,每0.4-4μg RNA 溶液加入1μl的RNA长期保存液,混匀。注意混合液中RNA长期保存液的体积百分比不低于80%。
3) 测定OD值。注意加入相应量的RNA 长期保存液做空白。
4) 将溶解的RNA 样品储存于-20 ºC或者-70 ºC。
2. 从RNA长期保存液中沉淀RNA:
1) 估计RNA 溶液终体积。加入4 倍体积的无水乙醇,混匀。如果溶液体积过小操作不便,可加入RNase free water 稀释RNA溶液,如果溶液中RNA 含量低于0.25μg /μl,可加入5M的NaCl(RNase free) 至终浓度0.2M,混匀,然后再加入4 倍体积乙醇。
2) 室温放置5 分钟。
3) 12,000 rpm离心5 min,弃上清,风干,溶解。
4) 重新沉淀的RNA溶解后可用于RT-PCR 反应,也可用于任何其他实验。
3. 直接使用RNA长期保存液中的RNA:直接吸取RNA长期保存液中的RNA,进行普通或甲醛变性电泳和Northern Blot。进行甲醛变性电泳时,最后上样的样品中的RNA长期保存液的浓度可高达50%。
附:甲醛变性电泳样品准备:临用前,混合水(87μl),甲醛(81μl), 50%甘油/含0.25 mg/ml溴芬兰(48μl ) 和20x的MOPS (24uL),将上述混合液和RNA长期保存液中的RNA样品等体积混合,55 ºC温育10分钟,按照标准的甲醛变性电泳过程上样。
注意事项:
1. RNA长期保存液可能抑制逆转录酶活性,做RT-PCR反应前应该用乙醇沉淀RNA。
2. 在RNA 长期保存液中的RNA 的终浓度不应该超过4μg /μl。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4. 本制品仅供科研使用,严禁用于临床和诊断。
品牌: | 爱普科学 |
产品别名: | AipSave RNA Long-Term Preservation Solution |
规格: | 2mL |
性状: | 液体 |
储存温度: | 2-8℃ |
保质期: | 12个月 |
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