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储运温度:-20 ℃保存,保质期一年,避免起泡,避免剧烈振荡或搅拌。
产品介绍:本制品是经过大肠杆菌表达的重组蛋白,与RNase A形成1:1复合体,对RNase 表现高度的非竞争性抑制(Ki=3×10-10 M)。该反应是可逆的,通过尿素及疏基类试剂能够解离复合体,使RNase 复活而抑制剂不可逆失活。本品属蛋白质性质,与其它竞争性抑制剂(核酸类、无机磷酸类)不同,可以很容易地通过苯酚处理将其从反应体系中除去。
活性定义:抑制5 ng的RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
第一链cDNA合成:(以20 μl反应体系为例)
1. 加入:
Components | Volume |
Total RNA/mRNA | 50 ng-5 μg/5-500 ng |
Oligo(dT)18(0.5 μg /μl)or Random Primer(0.1 μg/μl) or GSP(Gene Specific Primer) | 1 μl |
1 μl | |
2 pmol | |
dNTP Mixture (10 mM each) | 1 μl |
5× RT Buffer | 4 μl |
RNase Inhibitor(40 units/μl) | 0.5-1 μl |
AipScript Hˉ RTase | 1 μl |
RNase free H2O to final volume | 20 μl |
2. 轻轻混匀:
如用Oligo(dT)18或基因特异引物(GSP),42℃孵育50min。
如用Random Primer,25℃孵育10 min,42℃孵育50 min。
3. 70℃加热5 min失活AipScript Hˉ RTase。
RT-PCR:反转录所得的cDNA可直接用于PCR反应或储存于-20°C。
注意事项:
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 本制品仅供科研使用,严禁用于临床和诊断。
品牌: | 爱普科学 |
产品别名: | AipPure RNase Inhibitor |
规格: | 2000U/50uL |
性状: | 液体 |
储存温度: | -20℃ |
保质期: | 12个月 |
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