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货号及规格:
目录编号 | 包装规格 |
M365-01 | 100 mL*3 |
组分货号 | 组分名称 | 规格 | 储存温度 |
M365-1 | DAB | 100mg | 2-8℃ |
M365-2 | 磷酸缓冲液(pH 3.8) | 100mL | RT |
M365-3 | DAB样本保存液 | 100mL*2 | RT |
储存条件:冰袋运输;2-8℃避光保存,有效期12个月,收到后请按照各组分储存温度进行保存。
产品概述:植物组织在胁迫环境条件下会产生多种活性氧(ROS),ROS活性非常大且极其不稳定,因此ROS的检测通常因其最终产物而定。过氧化氢是活性氧的一种。在过氧化氢酶的催化下,过氧化氢能与DAB(3,3-二氨基联苯胺四盐酸盐)迅速反应生成棕红色化合物,从而定位组织中的过氧化氢,根据基本原理也称其为DAB法。本产品就是基于以上原理,用于植物活组织中的过氧化氢染色。一般应用于较嫩的根尖、叶片等的整体染色,染色后有过氧化氢聚集的部位呈棕色至深棕色。
操作步骤:
1. 试剂准备:将100 mg DAB以磷酸缓冲液100 mL充分溶解,得到DAB染色工作液,避光4℃保存,一周内有效。注:DAB对光敏感,溶解过程需要避光,如果较难溶解,可通过超声、磁力搅拌等方法促进溶解。
2. 采集经胁迫(例如重金属)的植物幼苗或根尖,纯水稍洗净,置于滤纸上吸干多余的水分。将植物幼苗或根尖浸没在DAB染色工作染液中,常温避光染色2-6 h,至阳性部位出现深棕色,其余部位近无色或者呈植物本身的颜色即可。(根据植物幼嫩程度、显色程度调整染色时间)
3. 用镊子将植株幼苗或者叶片小心取出,浸入纯水中来回漂洗3-5次,置于滤纸上吸干多余水分后,浸入95% 乙醇中40℃处理3-16 h,目的是脱去植株幼苗或者叶片本身的叶绿素,脱色期间可多次更换新鲜的95% 乙醇。
4. 用镊子取出植株幼苗或者叶片,浸入纯水中来回漂洗3-5次,置于滤纸上吸干多余水分后,将样本转入适量DAB样本保存液中浸泡30 min,随后可取出拍照。样本可置于该保存液中常温保存一周。
注意事项:
1. DAB染色工作液配制好以后需4℃避光保存,一周内使用。存放时间过久,会影响显色。
2. 因过氧化氢容易分解,且任何外在因素都可能刺激植物应激产生过氧化氢,因此植物样本需要新鲜采集,并尽快完成染色。建议做阴性及阳性空白对照组。
3. 样本染色完成后尽快拍照保存结果。
4. 为了您的健康和安全,操作时请穿好实验服、戴好手套。
5. 本产品仅供科研使用,不得用于临床和诊断。
品牌: | 爱普科学 |
产品别名: | Plant Hydrogen Peroxide Staining Solution(DAB) |
规格: | 100mL*3 |
性状: | 液体 |
储存温度: | 2-8℃ |
保质期: | 12个月 |
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