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植物过氧化氢染色液(DAB法)

货号:M365-01

品牌:爱普科学

货期:现货

价格:220

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货号及规格:

目录编号

包装规格

M365-01

100 mL*3

产品组成:

组分货号

组分名称

规格

储存温度

M365-1

DAB

100mg

2-8℃

M365-2

磷酸缓冲液(pH 3.8

100mL

RT

M365-3

DAB样本保存液

100mL*2

RT

储存条件:冰袋运输;2-8℃避光保存,有效期12个月,收到后请按照各组分储存温度进行保存。

产品概述:植物组织在胁迫环境条件下会产生多种活性氧(ROS),ROS活性非常大且极其不稳定,因此ROS的检测通常因其最终产物而定。过氧化氢是活性氧的一种。在过氧化氢酶的催化下,过氧化氢能与DAB3,3-二氨基联苯胺四盐酸盐)迅速反应生成棕红色化合物,从而定位组织中的过氧化氢,根据基本原理也称其为DAB法。本产品就是基于以上原理,用于植物活组织中的过氧化氢染色。一般应用于较嫩的根尖、叶片等的整体染色,染色后有过氧化氢聚集的部位呈棕色至深棕色。

操作步骤:

1. 试剂准备:将100 mg DAB以磷酸缓冲液100 mL充分溶解,得到DAB染色工作液,避光4℃保存,一周内有效。注:DAB对光敏感,溶解过程需要避光,如果较难溶解,可通过超声、磁力搅拌等方法促进溶解。

2. 采集经胁迫(例如重金属)的植物幼苗或根尖,纯水稍洗净,置于滤纸上吸干多余的水分。将植物幼苗或根尖浸没在DAB染色工作染液中,常温避光染色2-6 h,至阳性部位出现深棕色,其余部位近无色或者呈植物本身的颜色即可。(根据植物幼嫩程度、显色程度调整染色时间)

3. 用镊子将植株幼苗或者叶片小心取出,浸入纯水中来回漂洗3-5次,置于滤纸上吸干多余水分后,浸入95% 乙醇中40℃处理3-16 h,目的是脱去植株幼苗或者叶片本身的叶绿素,脱色期间可多次更换新鲜的95% 乙醇。

4. 用镊子取出植株幼苗或者叶片,浸入纯水中来回漂洗3-5次,置于滤纸上吸干多余水分后,将样本转入适量DAB样本保存液中浸泡30 min,随后可取出拍照。样本可置于该保存液中常温保存一周。

注意事项:

1. DAB染色工作液配制好以后需4℃避光保存,一周内使用。存放时间过久,会影响显色。

2. 因过氧化氢容易分解,且任何外在因素都可能刺激植物应激产生过氧化氢,因此植物样本需要新鲜采集,并尽快完成染色。建议做阴性及阳性空白对照组。

3. 样本染色完成后尽快拍照保存结果。

4. 为了您的健康和安全,操作时请穿好实验服、戴好手套。

5. 本产品仅供科研使用,不得用于临床和诊断。

品牌: 爱普科学
产品别名: Plant Hydrogen Peroxide Staining Solution(DAB)
规格: 100mL*3
性状: 液体
储存温度: 2-8℃
保质期: 12个月
地址:北京市昌平区北清路1号珠江摩尔国际大厦5号楼2单元305
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