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Tris-EDTA抗原修复液(50×),pH 8.0

货号:M307-01

品牌:爱普科学

货期:现货

价格:90

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产品储存:4℃保存,保质期12个月。

产品简介:

    EDTA抗原修复液是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试 剂固定后的抗原修复。

    细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,组织中的许多氨基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。因此,对于石蜡切片,要求在进行IHC染色前,先进行抗原修复,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,恢复抗原的原有空间形态。EDTA缓冲液是除柠檬酸缓冲液外另一种常用的IHC抗原修复液。有部分抗原用EDTA缓冲液修复效果好于柠檬酸缓冲液。特别是对于某些核抗原效果会更明显。

    本抗原修复液采用了广泛使用的EDTA,可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。

    本产品可以配制成5000mL抗原修复液(1X)。按照每个玻片需要10mL抗原修复液(1X)计算,本产品可用于500 个样本的抗原修复。

使用方法(参考):

一、 石蜡切片

1. 脱蜡:

(1) 浸泡在二甲苯中3次,每次3〜5min,每次更换新的二甲苯。

(2) 无水乙醇脱水2次,每次3〜5min。

(3) 95%乙醇3-5min。

(4) 90%乙醇3-5min。

(5) 70%乙醇3-5min。

(6) 蒸馆水冲洗两次,每次3〜5min。

2. 抗原修复:

(1) 用去离子水或双蒸水稀释TRIS-EDTA抗原修复液(50X)至1X,例如1mL TRIS-EDTA抗原修复液(50X)加入 49mL去离子水,混合均匀,即可得1X TRIS-EDTA抗原修复液。

(2) 抗原修复液(1X)使用前需预热至95°C。

(3) 将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100°C加热约20分钟。

3. 冷却至室温后,免疫染色洗涤液洗涤1〜2次,每次3〜5分钟。

4. 进行封闭等后续的免疫染色步骤。

二、 冰冻切片

(1) 用去离子水或双蒸水稀释TRIS-EDTA抗原修复液(50X)至1X。

(2) 免疫染色洗涤液洗涤切片3〜5分钟。

(3) 将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95°C或沸水加热约20分钟。

(4) 抗原修复液(1X)使用前预热至95-100°C。

(5) 冷却至室温后,免疫染色洗涤液洗涤1〜2次,每次3〜5分钟。

(6) 进行封闭等后续的免疫染色步骤。

注意事项:

1. 浸泡在抗原修复液(1X)中,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行实验。

2. 如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4. 本产品仅供科研使用,严禁用于临床诊断和药物等。

品牌: 爱普科学
产品别名: Tris-EDTA Antigen Repair Solution (50×),pH 8.0
规格: 100mL
性状: 液体
储存温度: 2-8℃
保质期: 12个月
暂无信息
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