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AipBest 寡核苷酸纯化试剂盒(离心柱型)

货号:DR204-01

品牌:爱普科学

货期:现货

价格:450

50T
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产品储存:按照指定温度储存,12个月内不影响使用效果。

储存事项:避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

产品介绍:本试剂盒使用特殊的结合缓冲液能够高效纯化>15nt的单链或者双链DNA和RNA。特别适用于从标记反应(地高辛标记,同位素标记,生物素标记等)混合物中回收小片段标记探针,去除未反应的核苷酸、短oligos、染料、酶、盐离子等。典型的回收率高达80-90%,每个离心吸附柱每次可吸附的DNA量为10µg。使用本试剂盒回收的RNA或者DNA可适用于in Situ Hybridization、Northern blot、RNAi、Gel shift assay、Ligation、Sequencing、Microarray analysis等实验。

产品特点:

1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好

2. 使用了优质结合液,不含传统结合液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应

3. 独特的配方保证了该试剂盒比一般试剂盒回收效率大大提高。并且适用于回收单链或者双链DNA和RNA

4. 快速便捷,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀

注意事项:

1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机。

2. 结合液中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或者生理盐水冲洗

3. 本试剂盒适用于无选择性的回收溶液中所有核酸片段,如需选择性回收特定片段,同时去除其他不同大小片段,请选择胶回收试剂盒。

4. 虽然本试剂盒推荐用于回收小片段或者寡聚核苷酸(>15nt),但是也可以高效回收<10kb的较大片段DNA或者RNA。

5. 回收RNA应该用本试剂盒带的RNase-free Water来洗脱。并保存在-70℃。DNA片段也可以根据需要用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),如果担心EDTA可能影响下游反应,使用时可以适当稀释。或者可以直接用(10mM Tris-HCl pH 8.0)洗脱。

关于平衡液的使用:

1. 介绍:核酸吸附硅胶膜柱子长期放置过程中会同空气中的电荷/尘埃发生反应而影响其核酸的结合能力。硅胶柱经平衡液预处理后可大大减少柱子中硅胶膜的憎水基团,提高核酸的结合能力。从而提高硅胶柱子回收效率或者产量。平衡液是强碱性溶液,若不小心碰到,请用大量自来水清洗。用完后需盖紧瓶盖,以免接触空气。室温保存。在保存过程中可能有沉淀生成,请加热至37℃使沉淀完全消失。

2. 使用方法:取一个新的硅胶膜吸附柱子装在收集管中,吸取100μL的平衡缓冲液至柱子中。13,000rpm离心1分钟,倒掉收集管中废液,将吸附柱子重新放回收集管。此时平衡液预处理柱子完毕。接后续的操作步骤。

操作步骤:

提示:第一次使用前请先在结合液OB瓶中加入指定量异丙醇!第一次使用前请先在漂洗液RW中加入指定量无水乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!

1. 估计样品体积(最低体积50μL,不够可用灭菌水补足;回收RNA需要用RNase-free Water补足),向其中加入10倍体积的结合液OB,温和地充分混匀(PCR反应体系无需去除石蜡油或矿物油)。

注:回收>100bp片段时候,只需要加5倍体积结合液OB。

平衡液预处理吸附柱:使用平衡液预处理硅胶膜吸附柱为必做步骤,具体方法参见前文“关于平衡液的使用”

2. 将上一步所得溶液加入吸附柱RA中(吸附柱放入收集管中),室温放置1分钟,12,000rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废液。

注:吸附柱最大容积为720µl,若溶液体积大于720µl,可分批加入。

3. 加入500μL漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm 离心30秒,弃掉废液。

4. 加入500μL漂洗液RW,12,000rpm离心30秒,弃掉废液。

5. 将吸附柱RA放回空收集管中,13,000rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

6. 取出吸附柱RA,放入一个干净的离心管中,在吸附膜的中间部位加30-50μL RNase-free Water,室温放置2分钟,12,000rpm 离心1分钟。如果需要较高浓度核酸,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,离心1分钟。

注:洗脱体积越大,洗脱效率越高。如果需要核酸浓度较高,可以适当减少洗脱体积,但是最小体积不应少于25μL,体积过小降低核酸洗脱效率,减少产量。

品牌: 爱普科学
产品别名: AipBest Oligo Purification Kit(Centrifugal Column)
规格: 50T
性状: 液体
储存温度: RT
保质期: 12个月
产品说明: 收到产品后,请尽快按照试剂盒内各组分的储存温度保存!
地址:北京市昌平区北清路1号珠江摩尔国际大厦5号楼2单元305
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