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产品储存:4℃运输,-20℃保存,有效期24个月。
产品浓度:5U/µL
适用范围:一般用于高灵敏度和有较强背景的基因组扩增(如基因组中某个特定基因位点或外源病原体检测)、DNA序列测定、Multiplex PCR、TA克隆等。
制品说明:HotMaster Taq DNA polymerase采用了国际上最新专利的合成亲和性配体技术,该配体可以以一种温度依赖性的方式来可逆性地阻断酶的活性。该酶与一般Hot-start酶不同之处在于,一般的Hot-start酶只在第一步温度升高之前封闭酶的活性,而HotMaster Taq DNA聚合酶利用抑制性配体通过温度调节方式封闭 HotMasterTaq DNA聚合酶的底物结合位点,温度低于40℃时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高至引物特异性的退火温度时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此最大限度的减少PCR扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了PCR反应的精确性。PCR产物3' 端为A,可直接用TA载体克隆。
活性单位:1单位(U)HotMaster Taq DNA Polymerase活性定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板引物,将10 nmoL脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制:SDS-PAGE检测纯度大于99%,经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
产品特点:操作快速便捷,不需要额外加热激活;持续退火时酶活性控制,达到全程热启动效果;PCR过程无变性抗体等蛋白污染。
反应举例:以下举例为常规PCR反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物长短等具体情况,设定最佳反应条件。10× HotMaster Taq Buffer中含有Mg2+,配有浓度为15mM MgCl2。实际PCR反应可因模板等的不同酌情向反应体系中添加适量的Mg2+,设置最佳的反应体系。
建议的PCR条件:(以50µL反应体系为例)
Components | Volume(50μL) |
Template | <0.5μg |
Forward Primer(10μM) | 1µL |
Reverse Primer(10μM) | 1µL |
10×Buffer+(with MgCl2) | 5µL |
dNTP Mixture(2.5mM each) | 4µL |
Taq DNA polymerase(5U/µL) | 0.5µL(0.25~1µL) |
ddH2O | Final volume to 50 µL |
注意事项:
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 本制品仅供科研使用,严禁用于临床诊断和药物等用途。
品牌: | 爱普科学 |
产品别名: | 冷抑制热启动Taq DNA聚合酶 |
规格: | 500U/2500U |
性状: | 液体 |
储存温度: | -20℃ |
保质期: | 24个月 |
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