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DNA快速连接试剂盒

货号：CV210-01

品牌：爱普科学

货期：现货

价格：￥320

规格：

20次 60次

数量：

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产品储存：-20℃保存，保质期一年，避免反复冻融次数过多。

制品说明：本试剂盒可在室温(22℃)10分钟条件下，迅速完成DNA片段粘端或平端连接反应。连接产物可直接转化。可用于DNA片段克隆，文库构建，TA克隆，Linker连接等。

产品特点：快速简单、粘端平端均可以在10分钟内完成连接反应。

操作步骤：

1. 应按以下体系进行：

2× Quick Ligation Buffer	5μL
Vector DNA(30-60ng)	μL
Insert DNA(载体摩尔数量的3倍量，插入和载体摩尔比为3:1)	μL
无菌水	μL
T4 DNA Ligase	1μL(5 Weiss Units/μL)
Final Volume	10μL

█ 一般最后加入T4 DNA Ligase，充分混匀，可瞬间离心收集液体至管底。

2. 22°C连接10分钟(一般可在PCR仪器完成)。

注：通常推荐22°C连接5-10分钟，>3kb长片段连接可以延长至30分钟。不推荐超过30分钟，超过可能降低转化子数量。

3. 冰上冷却，然后直接转化或贮存于-20°C

注：如储存于-20°C，转化前应该置冰上重新溶解，充分混匀后进行转化。

注意事项：

1. 转化前不要热灭活T4 DNA Ligase，否则将降低转化效率。

2. DNA片段体积大于4μL的，可增加2× Quick Ligation Buffer，总反应体积相应可以增至20μL，这样在连接体系中可加入更大体积的DNA片段。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4. 本制品仅供科研使用，严禁用于临床和诊断。

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