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保存条件:常温运输,4℃保存,有效期12个月;APS干粉配制溶液后需-20℃保存。
产品简介:本公司提供的SDS-PAGE快速制胶试剂盒包含凝胶制备所需的全部试剂。以常用规格8.3 cm×7.3 cm凝胶板为例,本试剂盒可制备50块SDS-PAGE凝胶,具体可以配制的数量与凝胶的厚度及凝胶的尺寸有关。
凝胶选择:(请根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,具体可参考下表)
使用方法:
一、分离胶制备:
1. 配制分离胶前,根据以下配方准备10% APS(以10% APS配制5mL为例):
将0.5g APS干粉溶于5mL灭菌水中,彻底溶解后分装,1mL/支,-20℃备存,每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间,以防失效。10% APS在4℃有效期为一周,-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20℃保存的10% APS。
2. 制备分离胶步骤:
1) 参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
2) 按照SDS-PAGE分离胶配方表将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合;加入 10% APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3) 在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于Mini-Gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5cm的水层,使凝胶表面保持平整。
4) 静置15-20分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,说明凝胶已聚合。
5) SDS-PAGE分离胶配方表如下:
二、浓缩胶制备:
1. 去除覆盖在分离胶上的水层。
2. 按照SDS-PAGE浓缩胶(4%)配方表将不同体积成分在一个小烧杯或试管中混合。
3. 加入10% APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4. 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5. 将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
6. 静置30-40 min,等待浓缩胶聚合。
7. SDS-PAGE浓缩胶(4%)配方表如下
注意事项:
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套进行实验操作。
2. 本试剂仅供科研使用,严禁用于临床诊断和药物等用途。
品牌: | 爱普科学 |
英文名称: | AipGel Fast SDS-PAGE Gel Kit |
规格: | 50T |
性状: | 液体 |
储存温度: | 2-8℃ |
保质期: | 12个月 |
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