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产品储存:4℃运输;-20℃保存,12个月有效期。
产品简介:T5 Exonuclease即T5核酸外切酶,来源于T5噬菌体D15基因由大肠杆菌重组表达,是一种按照5'→3'方向降解双链或单链DNA的核酸外切酶。T5 Exonuclease可以从线性或环状双链DNA的末端、缺口(gap)或缺刻(nick)处起始消化但无法降解超螺旋双链DNA。主要用于Gibson组装或其他无缝克隆、降解线性和缺刻质粒DNA等。
产品来源:来源于T5噬菌体,由大肠杆菌重组表达。
酶活定义:在37℃、50μL反应体积条件下,30min内从双链DNA水解产生1nmol酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量定义为一个灭活单位。
产品浓度:10U/μL。
产品纯度:SDS-PAGE检测纯度≥95%。
失活或抑制:EDTA终浓度大于11mM可以使酶失活。
酶存储Buffer:50mM Tris-HCl,100mM NaCl,1mM DTT,0.1 EDTA,50%Glycerol,0.1%Triton X-100,pH7.5。
10x T5 Reaction Buffer:500mM Potassium Acetate,200mM Tris-acetate,100mM Magnesium Acetate,1mM DTT,pH 7.9。
操作步骤:
1. 参考下表配置反应体系:
Component | Volume |
T5 Exonuclease | 1μL |
10х T5 Reaction Buffer | 5μL |
DNA样品 | ≤1μg |
Nuclease-Free water | To 50μL |
2. 配置好反应体系后充分混匀,于37℃孵育10-30min。
3. 反应完成后立即冰浴并加入EDTA至终浓度为11mM,终止反应。
注意事项:
1. T5 Exonuclease对DNA底物具有一定的选择性,其对不同的DNA底物显示出不同的反应活性。因此,需要适当控制好酶量和反应时间。
2. T5 Exonuclease在50℃也具有一定的活性,因此可用于Ginson组装。
3. 酶的取用都应放在低温冰盒内操作,使用完毕后立即存储于-20℃保存。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5. 本产品仅供科研使用,严禁用于临床诊断和药物等用途。
品牌: | 爱普科学 |
英文名称: | T5 Exonuclease |
规格: | 1KU |
性状: | 液体 |
储存温度: | -20℃ |
保质期: | 12个月 |
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