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产品储存:4℃运输;-20℃保存,12个月有效期。
产品简介:Uracil-DNA Glycosylase简称UDG,来源于大肠杆菌,可催化含尿嘧啶的 DNA链中的尿嘧啶(dU)碱基和脱氧核糖之间的N-糖苷键发生水解,从而释放游离尿嘧啶。Uracil-DNA Glycosylase(UDG)可以水解含有dU的单链或双链DNA,但不能水解RNA或含有dU的长度不超过6个碱基DNA寡聚体。UDG主要用于消除PCR扩增过程中带来的产物污染问题。
产品来源:来源于大肠杆菌,由大肠杆菌重组表达。
酶活定义:在37℃条件下,1min内催化60pmol尿嘧啶从含尿嘧啶的双链DNA上释放所需的酶量定义为一个酶活单位。通过30min内从50μL含0.2μg DNA(104-105cpm/µg)的反应体系中释放[3H]-尿嘧啶的量来确定酶活。
产品浓度:5U/μL。
产品纯度:SDS-PAGE检测纯度>95%。
失活或抑制:95℃孵育10min可以使95% UDG失活。
酶存储Buffer:10mM Tris-HCl,50mM KCl,0.1mM EDTA,1mM DTT,0.1mg/mL BSA,50%glycerol,pH 7.4。
10x UDG Reactin Buffer:200mM Tris-HCl,10mM EDTA,10mM DTT,pH 8.0。
操作步骤:
1. 参考下表配置反应体系:
Component | Volume |
Uracil-DNA Glycosylase(UDG) | 0.2μL |
Taq DNA polymerase(5U/μL) | 0.25μL |
10х PCR Reactin Buffer | 5μL |
dNTP/dUTP(2.5mM each/5mM) | 4μL |
Primer Mix(10μM each) | 4μL |
Template | x μL |
Nuclease-Free water | To 20μL |
2. 反应体系配置好后充分混匀,37℃孵育10min(本步骤可以有效去除可能之前含dUTP的PCR产物污染)。
3. 后续可以立即进入PCR扩增程序。
注意事项:
1. UDG酶在大多数PCR反应缓冲液体系中均有活性,但对于自行使用的PCR或RT-PCR体系,首次使用时建议先测试一下是否和所使用的体系兼容。
2. 酶的取用都应放在低温冰盒内操作,使用完毕后立即存储于-20℃保存。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4. 本产品仅供科研使用,严禁用于临床诊断和药物等用途。
品牌: | 爱普科学 |
英文名称: | Uracil-DNA Glycosylase(UDG) |
规格: | 1KU |
性状: | 液体 |
储存温度: | -20℃ |
保质期: | 12个月 |
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