储运温度：冰袋运输；-20℃保存，有效期 12 个月。

制品说明：支原体污染会对细胞各个方面都造成不良影响，已经成为细胞培养中高度重视的问题，因此，定期进行支原体污染检测是十分必要的。本支原体检测试剂盒是采用 PCR 方法，特异性的检测各种培养细胞生物材料(如细胞培养物、实验动物分泌物、动物血清等)中支原体的污染。

产品特点：试剂盒使用的混合引物是针对支原体 16s rRNA 序列的保守区域设计的特异性引物，可直接使用细胞培养液作为PCR模板，特异性扩增支原体DNA，搭配配套的 Mycoplasma PCR Mix(2×)一小时内即可完成，本试剂盒检测灵敏度高，可检测低至 20 个拷贝的支原体。

操作步骤：

1. 样品准备：取适量待检细胞培养上清于洁净的 PCR管中，利用PCR仪 95℃热处理 5 min 后作为模板。血清样本可利用 Mycoplasma Free Water 稀释后，取适量样本于洁净的PCR管中，利用PCR仪 95℃ 热处理 5 min 后作为模板。

2. PCR 体系配制：每次实验需设置阴性对照(将1μL待检样品换成等量的 Mycoplasma Free Water)与阳性对照(在1μL待检样品中加入0.5μL Positive Control 后一起作为 Template)，实验时戴一次性口罩与手套，谨慎操作，防止操作不当引入外源支原体污染。

3. PCR 程序设置：

4. 凝胶电泳：取10μL PCR产物，使用1%琼脂糖凝胶进行电泳检测。

5. 结果分析：每次实验通过与阴性对照、阳性对照检测结果比较确认样品支原体污染情况，阳性条带大小500 bp 左右。如阴性对照检测结果中有条带很有可能是 PCR 体系中出现污染，建议重新实验确认结果。如有必要，也可对 PCR 产物进行常规测序，以确定具体的支原体种属。

注意事项：

1. 本试剂盒可以检测 M.orale，M.arginini，M.bovis，M.fermentans，M.gallisepticum，M.hominis，M.pirum，Ureaplasma spp，M.hyorhinis，M.pneumoniae，A.laidlawii 等至少 11 种以上支原体污染。

2. 所有试剂在使用前于冰上彻底解冻、混匀，使用完毕后于-20℃保存。

3. 每次实验必须设置阴性对照、阳性对照，实验组建议设置样品模板梯度。

4. 操作时必须佩戴口罩，严格按照PCR操作标准，防止引入外源污染影响实验结果。

5. 为了确保细胞实验的可靠性及稳定性，建议定期进行支原体污染检测。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7. 本制品仅供科研使用，严禁用于临床诊断和药物等用途。

产品说明书.pdf