LipoStar2000脂质体转染试剂/LipoStar2000 Transfection Reagent
货号:C101-01
品牌:爱普科学
货期:现货
价格:¥380
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储存条件:常温运输,4℃保存,保质期12个月,严禁-20℃冷冻。
产品概述:
1. LipoStar2000转染试剂是一种新型的阳离子脂质体转染试剂,适合于将核酸(DNA和RNA)转染至真核细胞,具有低细胞毒性、对多种类型的细胞都具有高转染效率,转染时血清的存在不影响转染效率的优点。
2. 适用范围:铁壁细胞和悬浮细胞(哺乳动物细胞系)的转染。
3. 质粒DNA的转染:对大多数细胞来说,DNA(ug)与LipoStar2000(uL)的比例为1:2~1:3。转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平,并能够减少细胞毒性。
使用方法:(以24孔板为例)
1. 细胞铺板:
1) 贴壁细胞:转染前一天,用500uL不含抗生素的培养基接种0.5-2*105细胞,使之第二天能达到70-90%汇合。
2) 悬浮细胞:在准备DNA-LipoStar2000复合物之前,用500uL不含抗生素的培养基接种4-8*105细胞即可。
2. 对每个转染样品,进行以下操作:
1) 在离心管里分别加入50uL无血清培养基(如:Opti-MEM I 培养基)和0.8ug DNA,轻柔混合,制成DNA稀释液。
2) 在另一个离心管里分别加入50uL无血清培养基(如:Opti-MEM I 培养基)和2uL LipoStar2000(注意用前先混匀),轻柔混匀,制成LipoStar2000稀释液,室温静置5分钟。
3) 将DNA稀释液和LipoStar2000稀释液混合,轻柔混匀,室温静置20分钟,形成DNA-LipoStar2000复合物,DNA-LipoStar2000复合物在室温下可稳定存在6小时。
3. 将DNA-LipoStar2000复合物加入到接种好的细胞中,将培养板轻轻地前后摇动,使复合物分散均匀。
4. 在37℃二氧化碳培养箱中培养4-6小时后更换培养基,继续培养18-48小时。
5. 如果要筛选稳定细胞株,则在转染24小时后将细胞按照1:10或更高的比例接种到新鲜培养基中,第二天加入选择性培养基进行筛选。
质粒DNA转染的优化:为达到最高转染效率和降低细胞毒性的影响,可以对DNA和LipoStar2000的比例以及细胞的密度进行优化,一般在1:0.5~1:5的范围内优化DNA(ug)和LipoStar2000(uL)的比例。
注意事项:
1. 本产品严禁-20℃冷冻,冷冻会使转染效率丧失。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或药品等。
品牌: | 爱普科学 |
英文名称: | LipoStar2000 Transfection Reagent |
规格: | 0.5mL/1mL/1.5mL |
性状: | 液体 |
储存温度: | 2-8℃ |
保质期: | 12个月 |
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