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一、RT-PCR产品介绍
1.对应Takara产品选择指南：
爱普科学货号 | 爱普科学产品名称 | Takara货号 | Takara产品名称 |
RT311 | AipScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit,第一链反转录试剂盒 | RR037A | PrimeScript™RT reagent Kit(Perfect Real Time) |
RT313 | AipScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit(With SuperMix),第一链反转录试剂盒(带预混合Mix) | RR036A | PrimeScript RT Master Mix(Perfect Real Time) |
RT315 | AipScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit(TwoStep gDNA Eraser),第一链反转录试剂盒(两步基因组清除) | RR047A | PrimeScript™RT reagent Kit with gDNA Eraser(Perfect Real Time) |
RT317 | UltraScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit(OneStep gDNA Removal),第一链反转录试剂盒(一步基因组清除) 该产品采用一步基因组清除，是目前最简单方便的带基因组清除的荧光定量反转录试剂盒。 | ||
OP101 | AipScript H Minus M-MuLV Reverse Transcriptase（反转录酶） | ||
OP102 | HotScript H Minus M-MuLV Reverse Transcriptase（耐热反转录酶） | ||
2.对应Takara的3种反转录产品(RT311/RT313/RT315)和高温反转录(RT312/RT314/RT316)：
爱普科学 货号 | 普通温度反转录 (42℃，必要时可以50℃反转录) | 爱普科学 货号 | 高温反转录 (50℃，必要时可以60℃反转录) |
RT311 | AipScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit,第一链反转录试剂盒 | RT312 | HotScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit,第一链耐热反转录试剂盒 |
RT313 | AipScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit(With SuperMix),第一链反转录试剂盒(带预混合Mix) | RT314 | HotScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit(With SuperMix),第一链耐热反转录试剂盒(带预混合Mix) |
RT315 | AipScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit(TwoStep gDNA Eraser),第一链反转录试剂盒(两步基因组清除) | RT316 | HotScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit(TwoStep gDNA Eraser),第一链耐热反转录试剂盒(两步基因组清除) |
3.第一链合成试剂盒（2步法反转录试剂盒）选择指南：
实验目的和 反转录温度 | 普通温度反转录(普通目的基因反转录首选) (42℃，必要时可以50℃反转录） | 高温反转录(GC含量高，复杂目的基因反转录首选) (50℃，必要时可以60℃反转录) |
反转录合成的cDNA下游用于荧光定量PCR | RT313/AipScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit(With SuperMix),第一链反转录试剂盒(带预混合Mix) | RT314/HotScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit(With SuperMix),第一链耐热反转录试剂盒(带预混合Mix) |
RT315/AipScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit(TwoStep gDNA Eraser),第一链反转录试剂盒(两步基因组清除) | RT316/HotScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit(TwoStep gDNA Eraser),第一链耐热反转录试剂盒(两步基因组清除) | |
UltraScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit(OneStep gDNA Removal),第一链反转录试剂盒(一步基因组清除) 该产品采用一步基因组清除！是目前最简单方便的带基因组清除的荧光定量反转录试剂盒！ | ||
反转录合成的cDNA下游用于普通反转录PCR(扩增基因克隆用,包括扩增全长片段目的基因) | RT311/AipScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit,第一链反转录试剂盒 | RT312/HotScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit ,第一链耐热反转录试剂盒 |
二、RT-PCR反转录选择
1. 反转录后如果下游做普通PCR、克隆基因或克隆全长：首选RT311/AipScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit(第一链反转录试剂盒)或RT312/HotScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit(第一链耐热反转录试剂盒)。注意：RT311和RT312首选用于普通反转录PCR(基因克隆用,包括扩增片段或者基因全长)，但是也可用于反转录荧光定量PCR。只是因为荧光定量有专门的RT313/RT314(不带基因组清除gDNA Eraser)和RT315/RT316(带基因组清除gDNA Eraser)，一般荧光定量PCR就不推荐用RT311和RT312了，但是如果用户要用，也是可以用于荧光定量PCR实验的。
2. 反转录后如果下游做荧光定量PCR： 首选RT313或RT315货号的RT-PCR试剂盒，RT313和RT315全都是预混合反转录Mix，只需加入RNA和水就可以进行实验，简单方便，都可以用于下游要做荧光定量的反转录。唯一区别就是RT313本身不带基因组清除剂，适合提取RNA的时候已经去除了DNA残留的RNA样品；而RT315带基因组清除剂，适合RNA提取后有微量DNA残留的情况下使用。3. 高温反转录试剂盒的选择：对应 RT311, RT313, RT315的3种产品使用普通42℃反转录酶，但是都有对应的55-60℃高温反转录酶升级版(RT311对应RT312, RT313对应RT314, RT315对应RT316)， 如果有比较复杂的样品，可以选择对应的高温反转录的版本试剂盒。4. 一步法基因组清除反转录试剂盒的选择：RT317/UltraScript First-Strand cDNA Synthesis RT-PCR Kit(OneStep gDNA Removal),第一链反转录试剂盒(一步基因组清除)，是我公司自主研发的热销爆款反转录试剂盒，该款试剂盒采用一步法基因组清除技术，可高效清除gDNA残留，实验操作流程更简单更方便！
