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产品选择问题

质粒提取试剂盒产品介绍及快速选购指南~

首先询问和确认客户是需要普通质粒提取(下游做PCR,或者酶切等普通应用)?还是需要无内毒素质粒提取(转染级)

——根据客户的需求给老师推荐适合的质粒提取试剂盒

1.客户需要普通质粒提取:

这种情况下,需要询问客户需要处理的菌液量,根据用户需要处理的菌液量选择不同处理量的质粒提取试剂盒,推荐如下:

1) 用户需要处理量1mL-5mL菌液(小量菌液),选择:PE202/ExtractPure 无内毒素高纯度快速质粒小提试剂盒(离心柱型)。

2) 用户需要处理量5mL-15mL菌液(小提中量菌液),选择:PE206/ExtractPure 无内毒素高产量质粒小提中量提取试剂盒(离心柱型)。

3) 用户需要处理量40mL-90mL菌液(重量菌液),选择:PE301/ExtractPure Plus 无内毒素质粒中提试剂盒(溶液型,转染级)。

注意:PE301是溶液型的,不是传统的离心柱型的方案,对操作的要求高一点,而且时间较长,推荐给客户前务必要给用户看说明书讲清楚,用户同意购买后在进行销售。

4) 用户需要处理量100mL-300mL菌液(大量菌液),选择:PE402/ExtractPure 无内毒素高纯度快速质粒大提试剂盒(离心柱型)。

注意:一般1mL-5mL菌液(小量菌液),首选PE202/ExtractPure 无内毒素高纯度快速质粒小提试剂盒(离心柱型),如果用户实在觉得还想提高产量浓度,实在不满意,在推荐试试PE205/ExtractPure 无内毒素高产量快速质粒小提试剂盒(离心柱型),这是因为PE205在提高产量的同时,对残留RNA的吸附能力也加强了,可能会残留更多的RNA(残留RNA不影响下游实验,但是会提高测OD值推算的浓度,造成测量浓度比实际浓度要高)。所以,一般PE202已经足够用了,实在想提高产量,才推荐PE205试剂盒试试。

2.用户需要无内毒素(转染级)质粒提取:

那么再询问客户需要处理的菌液量,根据用户需要处理的菌液量选择不同处理量的质粒提取试剂盒,推荐如下:

1)用户需要处理量1mL-5mL菌液(小量菌液),选择:PE203/ExtractPure Plus 无内毒素高纯度快速质粒小提试剂盒(离心柱型)。

2)用户需要处理量5mL-15mL菌液(小提中量菌液),选择:PE207/ExtractPure Plus 无内毒素质粒小提中量提取试剂盒(离心柱型)。

3)用户需要处理量40mL-90mL菌液(重量菌液),选择:PE301/ExtractPure Plus 无内毒素质粒中提试剂盒(溶液型,转染级)。

注意:PE301不是传统的离心柱型的方案,PE301也是溶液型的质粒提取,对操作的要求高一点,而且时间较长,推荐给客户前务必要给用户看说明书讲清楚,用户同意购买后在进行销售。

4)用户需要处理量100mL-300mL菌液(大量菌液),选择:PE403/ExtractPure Plus 无内毒素高纯度快速质粒大提试剂盒(离心柱型)。

3.碰到了困难样品的客户,离心柱提取失败或者效果不满意。

如果遇到低拷贝,质粒浓度低,用离心柱提取,需要比较大体积洗脱缓冲液洗脱,造成浓度低。或者大片段的质粒(10kb-250kb)用离心柱提取,传统离心柱提取,大质粒过离心柱时会断裂,产量和浓度低的情况。

——基于上述情况可以推荐我们的独家产品:PE405/ExtractPure Plus 无内毒素大型质粒大量提取试剂盒(溶液型,转染级)或者PE406/ExtractPure Plus 无内毒素BAC/PAC大型质粒提取试剂盒(溶液型,转染级)PE405PE406是完全一样的质粒提取产品,均采用独特的溶液型提取原理。

1) PE405产品介绍:

    本试剂盒用碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA,采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂,只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等杂质,获得高质量的质粒DNA。纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。纯化后期过程均在1.5mL小离心管中操作,方法简单,不需特殊设备,无需过柱,不用酚、氯仿抽提;基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒,不必担心质粒DNA的丢失。本方法提取纯化质粒DNA,对质粒损伤小,即使是10kb甚至100kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒,只要碱裂解法能够提取,就可以有效纯化。

2) PE405产品独特优势:

浓度高:采用独家的溶液型原理,可以选择任意小体积溶解质粒,浓度可高达5μg/μl。

内毒素低:一是使用内毒素清除剂,确保内毒素清除完全,适合任何一种细胞系转染。很多公司所谓无内毒素试剂盒,仅仅采用过滤吸附的方法来清除内毒素,清除效果不佳,对于敏感脆弱的细胞系转染效果就不好。

超螺旋比例高:采用特殊配方选择性沉淀超螺旋质粒,超螺旋质粒的比例远远大于一般离心柱无内毒素质粒提取产品,可高达99%,有利于转染。

可提取长片段质粒:采用不同于离心柱型原理的溶液型原理,普通离心柱型的试剂盒提取大片段尤其是超过10kb的质粒效果就很差,产量低或者质粒断裂,而本试剂盒可以提取高达100kb以上大质粒,最高可提取过250kb,也可以得到超高浓度的质粒,方便转染。

操作简单:比同类的产品操作大大简化,节约了时间成本。

价格低:价格比离心柱型的低约30%左右。

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