订购连接：RE250-AipPure 病毒基因组DNA-RNA快速提取试剂盒(离心柱型)

◆产品储存：室温储存12个月不影响使用效果， 各溶液使用后应及时盖紧盖子。注意：蛋白酶K保存在即用型甘油缓冲液中，常温运输。收到后，不超过25℃室温至少保存6个月，4℃保存12个月，－20℃保存2年。Poly Carrier常温运输，4℃可存放一个月，长期保存置于-20℃保存。

◆产品介绍：采用特异性结合病毒DNA/RNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，病毒DNA/RNA提取试剂盒适合于从无细胞体液，包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的病毒DNA/RNA。该产品可以满足绝大多数的病毒RNA/DNA的同时提取要求， 如病毒RNA：HCV（丙肝病毒）,HIV（艾滋病毒）,和HTLV（人类嗜T淋巴细胞病毒）； 病毒DNA：HBV（乙肝病毒）和CMV（巨细胞病毒）等等。病毒裂解后，DNA/RNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜（特别配备了Poly Carrier可以从体系中轻松捕获微量核酸），再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的病毒DNA/RNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的病毒核酸无杂质和PCR抑制剂，可直接适用于PCR/RT-PCR分析。

◆产品特点：

1. 不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。

2. 节省时间，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。

3. 多次柱漂洗确保高纯度，提取的病毒DNA/RNA 纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种常规操作，包括PCR/RT-PCR、酶切、测序、Southern 杂交等。

◆注意事项：

1.  所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。

2.  开始实验前将需要的水浴先预热到特定温度备用。

3.  Poly Carrier：

Poly Carrier使用方法：如果起始处理量很少，我们推荐使用Poly Carrier，如果预期有较大量核酸产量，用户可以根据需要选择是否加入Poly Carrier。使用时在每个样品提取所需裂解液VCB中加入2μl Poly Carrier储存溶液， 将裂解液VCB与Poly Carrier溶液充分颠倒混匀即可(裂解液VCB容易起泡沫，请勿使用涡旋振荡混匀)。也可根据样品数量，在总共需要的裂解液VCB中加入总共需要的Poly Carrier混匀备用。混合液在室温24小时内稳定。

◆操作步骤：(实验前请先阅读注意事项)

提示：第一次使用前请先在10ml漂洗液RW中加入40ml无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!

1.  在一个新的1.5ml 离心管内加入20μl蛋白酶k。

2. 向上述离心管内加入200μl血清等体液(需回复到室温，不足可用0.9% NaCl或者PBS补足)，加入200μl 裂解液VCB，立刻涡旋振荡充分混匀。

如果处理样品量小或者病毒预期浓度较低，建议在200μl裂解液VCB中加入2μl Poly Carrier储存溶液。

3.  56℃孵育15分钟。

4.  加入250μl无水乙醇，立刻涡旋振荡充分混匀，室温放置5分钟。

如果周围环境高于25℃,乙醇需要冰上预冷后再加入。

5.  将上述混合物加入一个吸附柱RA中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液。

6.   加入500μl去蛋白液RE，12,000rpm离心30秒，弃废液。

7.   加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000rpm 离心30秒，弃废液，加入500μl漂洗液RW，重复一遍。

8.   将吸附柱RA放回空收集管中，13,000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

9.   取出吸附柱RA，放入一个RNase free的离心管中，在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free H₂0（事先在 65－70℃水浴中加热效果更好）， 室温放置1分钟，12,000rpm 离心1分钟。如果想得到较多量的DNA/RNA，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，12,000rpm离心1分钟。

洗脱体积越大，洗脱效率越高。如果需要DNA/RNA浓度较高，可以适当减少洗脱体积， 但是最小体积不应少于20μl，体积过小降低洗脱效率，减少DNA/RNA产量。

10.  病毒DNA可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在-20℃。病毒RNA建议最好立刻使用，否则立刻短期放置在-70℃备用。

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