货号及规格：

试剂盒组成及储存：

储存条件：考马斯亮蓝G250溶液室温保存，配置好的蛋白标准液-20℃冻存。效期一年。

产品介绍：本公司生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒是根据目前广泛应用的蛋白浓度检测方法之一Bradford法研制而成。其操作简单，灵敏度高，检测速度极快。可检测浓度下限达25ug/mL的蛋白样品，最小检测蛋白量达到0.5ug，待测样品体积为1-20uL。本产品主要成分为考马斯亮蓝G250。

使用说明：

1. 取1ml蛋白标准配置液加入到25 mg BSA的蛋白标准管中，完全溶解蛋白标准品，即为25mg/mL的蛋白标准溶液。配制成的蛋白标准溶液可-20℃长期保存。

2. 取适量25mg/mL蛋白标准溶液，稀释至终浓度为0.5mg/mL。标准品最好与蛋白样品用同样的溶液稀释。但为了简便起见，通常使用0.9% NaCl或PBS稀释标准品。

3. 做标准曲线。将标准品按0,1,2,4,8,12,16,20uL加到96孔板中，不足20uL的加标准品稀释液补足到20uL。

4. 将待测的蛋白样品稀释至合适浓度，加到96孔板中，使待测样品总体积也为20uL。

5. 每孔加入考马斯亮蓝G250溶液200uL，充分混匀（可将酶标板放在振荡器上振荡30s)，室温放置3-5min后，以标准曲线0号做参比，在595m波长下比色测定，记录各孔吸光度值。以标准品蛋白含量(ug)为横坐标，吸光值为纵坐标，绘出标准曲线。

6. 如用分光光度计测定，请在第三步的时候将标准品体积改为1mL，浓度梯度用生理盐水稀释为0，1，2，5，10，15，30ug/mL，或根据样品调整浓度梯度。

7. 将样品稀释至合适浓度，加到小试管中，使待测样品总体积也为1mL。

8. 每只试管加考马斯亮蓝G250溶液3mL，充分混匀，室温放置3-5min后，以标准曲线0号做参比，在595nm波长下比色测定，记录各孔吸光度值。

注意事项：

1. 考马斯亮蓝G250溶液使用前请颠倒3-5次，混匀。

2. 蛋白标准请在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。

3. 将考马斯亮蓝G250溶液回复到室温再使用，有利于提高检测的灵敏。

4. Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中B-巯基乙醇的浓度可高达1M，二疏苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.01%，Triton X-100低于0.05%，Tween20，60，80低于0.015%。含去垢剂的样品推荐使用本公司生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(P301)。染色时间不能太长，否则活细胞会因染料积累而染成颜色，使检测结果偏低。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

6. 本产品仅供科研用途，不用于临床诊断和药物等。

产品说明书.pdf