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储运温度:常温运输;短期4℃保存,有效期1年;长期-20℃保存,有效期2年。
制品说明:本品含有DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分,适用于各种常见和肿瘤动物细胞株,冻存的细胞可在-80℃长期保存,无需经过程序性降温过程。
产品特点:本品的配方成分明确,不含有动物来源的蛋白,不含血清,可减少各类细菌、病毒和支原体等污染,保证冻存细胞的的安全,且适合无血清培养细胞核蛋白表达细胞。
操作步骤:
1. 细胞冻存步骤:
1) 常规方法收集对数期的贴壁细胞或者悬浮细胞于试管中。
2) 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存的细胞数。
3) 将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中,1000rmp离心5分钟,收集培养细胞沉淀,彻底弃去离心管中的上清液。
4) 加入适量的本冻存液于离心管中,使细胞浓度约为5*105-1*107/mL。轻柔地混匀细胞,制成细胞混合液。
5) 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中,建议每管1mL或1.5mL。
6) 直接将分装好的细胞冻存管置于-80℃超低温冰箱中,可长期保存。
7) 若需液氮长期保存,需先置于-80℃至少一天后方可转至液氮罐中。
2. 冻存细胞复苏步骤:
1) 从冰箱中取出冻存的细胞,立即置于37℃水浴槽中快速解冻。
2) 待冻存管的细胞混合液完全融化后,立即加入1mL细胞培养基于冻存管中与细胞混合,将其中的混合液移至含有约5mL该细胞培养基的离心管中,1000rmp离心5分钟,收集冻存细胞沉淀,移去上清液(注意勿将细胞沉淀倒掉)。
3) 加入适量的新鲜培养基,使用移液管缓缓加入细胞沉淀中,轻柔混匀,将混匀好的细胞移至事先准备好的培养容器中。
4) 镜检观察,待细胞状态恢复后可进行其他研究或者培养处理。
注意事项:
1. 本产品可用于常规细胞的冻存,-80℃可长期保存,细胞的存活率在90%—98%。
2. 使用本产品加入细胞后,应尽量减少室温存放时间,并尽快移至-80℃保存。
3. 对于干细胞(ES细胞)、原代等细胞冻存时,建议使用前,先对所要冻存的细胞进行至少1周以上的试验性冻存培养,确认效果后再正式大批量冻存。
4. 本产品含有10%DMSO,部分对DMSO敏感的细胞,建议先进行预实验,确认效果后再大量正式使用。
5. 对于没有保种的新的细胞类型,使用本品时建议冻存部分细胞于含血清的冻存液中,以避免可能的意外情况。
6. 取用冻存液要在超净工作台内无菌操作。
7. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
8. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或药品等用途。
品牌: | 爱普科学 |
英文名称: | Cell Frozen Liquid(Serum-Free) |
规格: | 100mL |
性状: | 液体 |
储存温度: | -20℃ |
保质期: | 24个月 |
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