产品储存：室温储存12个月不影响使用效果，各溶液使用后应及时盖紧盖子。注意：蛋白酶K保存在即用型甘油缓冲液中，常温运输，收到后，不超过25℃室温至少保存6个月，4℃保存12个月，－20℃保存2年。Poly Carrier常温运输，4℃可存放一个月，长期保存置于-20℃保存。

产品介绍：采用特异性结合病毒DNA/RNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，病毒DNA/RNA提取试剂盒适合于从无细胞体液，包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的病毒DNA/RNA。该产品可以满足绝大多数的病毒RNA/DNA的同时提取要求，如病毒RNA：HCV(丙肝病毒)、HIV(艾滋病毒)和HTLV(人类嗜T淋巴细胞病毒)；病毒DNA：HBV(乙肝病毒)和CMV(巨细胞病毒)等等。病毒裂解后，DNA/RNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜(特别配备了Poly Carrier可以从体系中轻松捕获微量核酸)，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的病毒DNA/RNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的病毒核酸无杂质和PCR抑制剂，可直接适用于PCR/RT-PCR分析。

产品特点：

1. 不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。

2. 节省时间，快速简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。

3. 多次柱漂洗确保高纯度，提取的病毒DNA/RNA 纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种常规操作，包括PCR、RT-PCR、酶切、测序、Southern 杂交等下游试验。

注意事项：

1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C或者类似离心机。

2. 开始实验前将需要的水浴先预热到特定温度备用。

3. Poly Carrier使用方法：如果起始处理量很少，我们推荐使用Poly Carrier，如果预期有较大量核酸产量，用户可以根据需要选择是否加入Poly Carrier。使用时在每个样品提取所需裂解液VCB中加入2μL Poly Carrier储存溶液，将裂解液VCB与Poly Carrier溶液充分颠倒混匀即可(裂解液VCB容易起泡沫，请勿使用涡旋振荡混匀)。也可根据样品数量，在总共需要的裂解液VCB中加入总共需要的Poly Carrier混匀备用。混合液在室温24小时内稳定。

操作步骤(实验前请先阅读注意事项)：

提示：第一次使用前请先在10mL漂洗液RW中加入40mL无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入！

1. 在一个新的1.5mL离心管内加入20μL蛋白酶K。

2. 向上述离心管内加入200μL血清等体液(需回复到室温，不足可用0.9% NaCl或者PBS补足)，加入200μL裂解液VCB，立刻涡旋振荡充分混匀。

注：如果处理样品量小或者病毒预期浓度较低，建议在200μL裂解液VCB中加入2μL Poly Carrier储存溶液。

3. 56℃孵育15分钟。

4. 加入250μL无水乙醇，立刻涡旋振荡充分混匀，室温放置5分钟。

注：如果周围环境高于25℃，乙醇需要冰上预冷后再加入。

5. 将上述混合物加入一个吸附柱RA中，(吸附柱放入收集管中)13,000rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液。

6. 加入500μL去蛋白液RE，12,000rpm离心30秒，弃废液。

7. 加入500μL漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!)，12,000rpm 离心30秒，弃废液，加入500μL漂洗液RW，重复一遍。

8. 将吸附柱RA放回空收集管中，13,000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

9. 取出吸附柱RA，放入一个RNase-free的离心管中，在吸附膜的中间部位加30-50μL RNase-free Water(事先在65-70℃水浴中加热效果更好)，室温放置1分钟，12,000rpm 离心1分钟。如果想得到较多量的DNA/RNA，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，12,000rpm离心1分钟。

注：洗脱体积越大，洗脱效率越高。如果需要DNA/RNA浓度较高，可以适当减少洗脱体积，但是最小体积不应少于20μL，体积过小降低洗脱效率，减少DNA/RNA产量。

10.  病毒DNA可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在-20℃。病毒RNA建议最好立刻使用，否则立刻短期放置在-70℃备用。

产品说明书.pdf