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产品储存:冰块运输,-20℃保存,保质期2年,室温存放一周,无明显活性改变。
产品浓度:0.1U/µL
产品介绍:
本制品包含Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。适用与高保真PCR反应、复杂模板如GC含量高(>60%),有二级结构等的扩增和大规模的基因检测。
本制品使用方便快捷,能避免PCR操作过程中的污染,使用时只需取适量2× Pfu PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。
染料说明:本制品不含染料。
产品组成:Pfu DNA Polymerase(Recombinant):0.05units/µL;MgCl2:4mM;dNTPs(dATP, dCTP, dGTP, dTTP):0.4mM。
质量控制:经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA;能有效地扩增人基因中的单拷贝基因。
适用范围:
1. 基因检测:本制品适合扩增长度≤3kb,不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测,半定量PCR实验和微量DNA的检测。
2. 高保真DNA扩增:如表达基因的克隆、基因的定点突变、细胞内基因点突变的分析(SNP)和末端补平。PCR产物为平端,纯化后可加A处理再与TA载体连接或使用平末端克隆载体。
反应举例:(以下举例仅供参考)
1. 用AipMix 2× Pfu PCR MasterMix制品,以人基因组DNA为模板,扩增1kb的片段,反应体系为25µL(如反应体系不同,可按此比例增加或减少用量)。
注:为了获得更好的扩增特异性,建议在冰上配制反应液。使用时将所有的溶液收集至离心管底部,然后再进行使用,减少损失;使用时应轻柔混匀(避免起泡),缓慢吸取。
2. PCR反应循环的设置:(以三步法PCR扩增为例)
注:以质粒为模板扩增,一般1kb/min就足够了。实际PCR反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据实际情况,设定最佳反应条件。
3. 结果检测:反应结束后,取5µL反应产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。如果是含染料Mix扩增的产物,可以不用加上样缓冲液,直接上样电泳即可。
品牌: | 爱普科学 |
产品别名: | AipMix 2×Pfu PCR预混合试剂(不含染料) |
规格: | 1mL/5*1mL/25*1mL |
性状: | 液体 |
储存温度: | -20℃ |
保质期: | 24个月 |
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