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产品储存:-20℃保存,有效期12个月。短时间内多次使用,2× AipDirect PCR Mix和Buffer AD1组分可暂存于2-8℃保存一个月,避免反复冻融次数过多。
制品说明:本制品采用独特的裂解缓冲液快速裂解动植物组织,释放的DNA无需纯化便可以作为模板,用高度耐抑制物的2× AipDirect PCR Mix扩增,扩增产物可直接上样电泳。
适用范围:动植物组织(哺乳动物,海洋动物,昆虫等)、细胞、唾液、毛发等。
产品特点:简单便捷,直接以裂解物为模版进行PCR,适合样品高通量筛选;一般扩增片段大小< 2.5kb。
操作步骤:
1. 配制即用裂解液:按照10μL Buffer AD1 + 90μL ddH2O = 100μL比例混合配制成即用裂解液。每个样品需要75μL即用裂解液,具体量可以根据样品数量按照比例放大配制即可。即用裂解液可常温存放1个月。
2. 取75μL裂解液于0.2mL PCR薄壁管中(没有PCR仪器者也可以用0.5mL离心管)。然后加入2mm见方的组织(切记不可多加,多加反而抑制下游PCR),组织块浸没在裂解液内。
3. 98℃裂解30min(建议PCR仪上操作),根据情况裂解时间可以在10分钟-1小时内调整。
4. 取出离心管迅速放冰上,加入75μL Buffer AD2,混匀,即可直接用做PCR模板或置于4℃或-20℃保存。
5. PCR扩增:
建议PCR条件:(以20μL反应体系为例)
Components | Volume | Final Concentration |
裂解混合物模板 | 1-2μL | as required |
2× AipDirect PCR Mix | 10μL | 1× |
Forward Primer(10μM) | 0.4μL | 0.2μM each |
Reverse Primer(10μM) | 0.4μL | 0.2μM each |
ddH2O to final volume | 20μL | Not applicable |
注意事项:
1. 如果扩增条带较弱,可以适当增加或者减少模板加入量,裂解混合物模板一般可以在1μL-4μL内调节。
2. 如果非特异扩增较多,可调整退火温度,或者适当增减模板用量。
3. 各溶液使用完毕后,应该立刻盖紧盖子,以免PH改变影响质量。
4. 裂解物2-8℃可保存三个月,-20℃保存六个月。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服幷戴一次性手套操作。
6. 本产品仅供科研使用,严禁用于临床诊断和药物等用途。
品牌: | 爱普科学 |
产品别名: | AipDirect 动物组织PCR直接扩增试剂盒 |
规格: | 100次*20uL/500次*20uL |
性状: | 液体 |
储存温度: | -20℃ |
保质期: | 12个月 |
产品说明: | 收到产品后,请尽快按照试剂盒内各组分的储存温度保存! |
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