产品储存：冰块运输，-20℃保存，保质期2年，室温存放一周，无明显活性改变。

产品介绍：

    本制品包含HiFi QuickLong DNA Polymerase、dNTPs和优化的反应缓冲液，浓度为2×。使用时只需加入模板、引物，并补足水至Mix终浓度为1×即可。

    本制品含红色示踪染料，不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳；也可经过纯化处理，以用于酶切、连接、荧光测序等后续实验操作。PCR产物3’ 端带A头，可直接用爱普科学：Zero Background pTOPO-TA Cloning Kit/零背景pTOPO-TA克隆试剂盒(货号CV214)和Zero Background pTOPO-TA Simple Cloning Kit/零背景pTOPO-TA Simple克隆试剂盒(不含多克隆酶切位点MCS)(货号：CV215)克隆。

染料说明：本制品含甲酚红，颜色可能在橘黄色和紫红色之间变化。颜色改变不影响产品质量和使用效果。

产品特点：

1. 超快速的扩增速度：延伸速度可以达到5-10秒/kb，最短半小时完成PCR扩增。

2. 突出的长片段扩增能力：可以扩增高达10kb左右的长片段(包括例如人类基因组此类的复杂模板)。

3. 较良好的保真性能：保真度较好，是Taq的3-6倍以上。

4. 超强大的扩增能力：PCR产量较高，对于一些具有特殊结构的复杂模板和GC含量高的模板均有良好扩增效果。

质量验证：爱普科学生产的每一批AipMix 2× HiFi QuickLong PCR MasterMix在出货前，都必须通过下面的2种大小片段的PCR扩增检测，如下图。

Figure.1. Amplification of DNA fragment from 50ng human genomic DNA in 50μL reaction mixture. Lane M: 1kb ladder; Lane 1-2: Hα1AT, 2.6kb, extension 10 sec/kb; Lane3-4: ß-globin, 6kb, extension 15 sec/kb.

建议PCR体系设置：

PCR扩增参考模板使用量(50μL反应体系)：质粒(0.1-10ng)；细菌基因组(10-100ng)；人类基因组(50-150ng)；cDNA(1-5μL from RT reaction)。

建议PCR循环条件：

注意事项：

1. AipMix 2× HiFi QuickLong PCR MasterMix扩增速度极快，短片段或者简单模板如质粒模板可以尝试5秒/kb延伸速度，并采用较少循环数以进一步缩短PCR时间。长片段(≥3kb)或者复杂模板产量较低，可以采用15-20秒/kb延伸速度，或者采用较多循环数。

2. AipMix 2× HiFi QuickLong PCR MasterMix产量较低时，可尝试采用较长的延伸时间(如20秒/kb)和循环数(如35个循环)，可以提高PCR产物的产量。

3. 对于GC含量很高的模板，短片段预变性和变性温度可以提高到98℃和/或适当延长变性时间。长片段为了避免DNA损伤不应该提高变性温度，应该适当延长预变性时间到5分钟，变性时间可以适当提高5-10秒。

4. 如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时，可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%-8%，按照1%梯度增加摸索最佳浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1.0-1.7 M。并采用降落PCR(Touchdown PCR)。

产品说明书.pdf