AipMix 2× HiFi SuperKOD PCR MasterMix(+Dye)
货号:GP120-01
品牌:爱普科学
货期:现货
价格:¥228
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产品储存:冰块运输,-20℃保存,保质期2年,室温存放一周,无明显活性改变。
产品介绍:
本制品包含HiFi SuperKOD DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。
本制品为预混合试剂,使用操作方便快捷,能避免PCR操作过程中的污染,使用时只需取适量AipMix 2× HiFi SuperKOD PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可快速进行PCR扩增反应。使用前请保证充分溶解并混匀,整个实验操作需在冰上进行。KOD酶所具有的超强3’→ 5’外切酶活性使得其扩增保真性比Pfu DNA Polymerase更高,保真性是Taq的约50倍,同时具有合成速度快的特点,聚合速度约为普通Pfu DNA Polymerase的5倍,Taq DNA Polymerase的2倍,达到100-138bp/秒,可以在短时间内获得高产量的PCR扩增产物,特别适合于高保真扩增6kb以内的PCR产物(复杂基因组DNA扩增建议不超过2kb),扩增所得的DNA为平末端,可用于基因克隆、表达及突变分析等分子生物学实验。
活性定义:75℃活性测定条件下,在30 min内摄入10 nmoles的dNTPs使成为酸性不溶物时所需要酶的活性定义为1U。
适用范围:本制品适合扩增复杂模板适合扩增≤2kb左右,简单基因组、质粒和噬菌体模板适合扩增≤6kb左右。主要用于PCR实验,尤其用于PCR产物的克隆,DNA片段的平滑化。
建议PCR条件:(以50μL反应体系为例)
注:用无菌PCR级别的水补至终体积50μL。实际操作中计算好需补加水的量后,建议先加水,然后按上述顺序添加其它成分,最后添加AipMix 2× HiFi SuperKOD PCR MasterMix(使用前请保证充分溶解并混匀),所有的溶液收集后充分混匀,离心数秒使反应混合物沉到管底,然后将反应管置于PCR仪中进行扩增。
注:为了获得更好的扩增特异性,建议在冰浴上混合PCR各种成分,防止KOD DNA聚合酶降解引物和模板。
PCR条件的优化:
1. 质粒或者噬菌体模板:模板量5-20ng,循环参数如下表
2. 基因组DNA和cDNA模板:基因组DNA模板量为50-100ng,1-2μL cDNA(起始转录用的RNA为500ng),循环参数如下表
问题与解决方法:
品牌: | 爱普科学 |
产品别名: | AipMix 2× HiFi SuperKOD PCR预混合试剂(含染料) |
规格: | 1mL/5*1mL/25*1mL |
性状: | 液体 |
储存温度: | -20℃ |
保质期: | 24个月 |
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